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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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EHA101 感受態(tài)細胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-G63310
  • 發(fā)布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2024-11-22
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63310
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 100ul*10 100ul*50 100ul*100
純度 %
是否進口

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

規(guī)格參數(shù):

產品名稱:EHA101 感受態(tài)細胞
規(guī)格 :100ul*10 100ul*50 100ul*100
分類:根癌農桿菌感受態(tài)細胞  
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

注意事項:


1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。

甲酯(>99.5%(GC),標準物質)質量規(guī)格:>99.5%(GC),標準物質Methyl Laurate   英文名稱MouseangiotensinogenELISAKit小鼠緊張素原(aGT)規(guī)格:96T/48T  雞補體蛋白4(C4) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

肉豆蔻酸甲酯(>99.5%(GC),標準物質)質量規(guī)格:>99.5%(GC),標準物質Methyl Myristate  RNA酶溶液(RNA酶保護分析)50毫升  人異鎖鏈素(IDES)試劑盒 Human Isodesmosine,IDES ELISA Kit

二十烷(>99.5%(GC),標準物)質量規(guī)格:>99.5%(GC),標準物質Eicosane  RabbitD-Dimer,D2DELISA試劑盒兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  可溶性CD105(sCD105)ELISA試劑盒 ,英文名: sCD105 ELISA Kit

二十一烷(>99.0%(GC),標準物質)質量規(guī)格:>99.0%(GC),標準物質Heneicosane  小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA試劑盒 ,英文名: ADCYAP1 ELISA Kit  RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒大鼠(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液1毫升/500毫摩爾  485-72-3芒柄花黃素說明書  Formononetin

Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  4773-96-0芒果苷品牌  Mangiferin

小鼠受體超家族成員10A(TNFRSF10A)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFRSF10A ELISA Kit  138-59-0莽草酸規(guī)格  Shikimic acid

犬特異性抗原(PSA)ELISA檢測試劑盒Canineprostatespecificaigen,PSAELISAKit 96T/48T  毛地黃素  Digitaline

犬生長激素(GH)試劑盒 Dog growth hormone,GH ELISA Kit  毛萼結晶甲說明書  Maoecrystal A

518-28-5鬼臼  Podophyllotoxin   植物種子高質化葉綠體分離試劑盒10

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EHA101 感受態(tài)細胞操作方法:

1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

聯(lián)系方式
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