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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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裸蓋魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P64510
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2021-01-25
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P64510
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50次
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進口

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

裸蓋魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

50

BK-P64510

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,65,4,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

中文名稱   方法   規(guī)格              Clopidogrel bisulfate  中文名:硫酸氫氯吡格雷  分子式:C16H18ClNO6S2 

中文名稱   方法   規(guī)格              5-O-Ethylcleroindicin D  中文名:  分子式:C10H16O4 

致病性大腸桿菌(EPEC)*試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Topiramate  中文名:托吡酯  分子式:C12H21NO8S  度:98.0%

質(zhì)粒中量提取試劑盒   Plasmid Exaction Kit  Torososide A  165689-32-7  中文名:  分子式:C38H32O15  度:關鍵詞:  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

質(zhì)粒中量提取試劑盒   50T  trans-4-Aminocyclohexanol  27489-62-9  中文名:  分子式:C6H13NO  度:98.0%  關鍵詞:
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KM933鹽酸育亨賓質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRYohimbine HCl

CD3E Others Human  CD3e / CD3 epsilon 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸育亨賓(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品Yohimbine HCl

臍帶間質(zhì)干細胞 Human umbilical cord mesenchymal stem cells硼標準溶液(100μg/mL,基體:水)質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:水Boron solution

Saos-2細胞,成細胞 鮮綠青霉 二倍體細胞;HEL鉍標準溶液(1000μg/ml,溶劑:1.5 mol/L HNO3)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:1.5 mol/L HNO3Bismuth solution

T/G HA-VSMC(平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2銅標準溶液(1000mg/l,溶劑:1%硫酸)質(zhì)量規(guī)格:1000mg/l,溶劑:1%硫酸Copper solution
內(nèi)根殼細胞總RNAHHIRSC NA二乙基錫(標準品)Diethyltin-dichloride質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,10ng/μl溶于

VEGFA Others Rat 大鼠 VEGF164 / VEGFA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 草萘胺(標準品)Napropamid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品

中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-除蟲脲標準溶液(10μg/ml,u=3%)Diflubenzuron solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%

NCI-H460[H460]細胞,大細胞細胞 ,H4細胞 小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32二噻農(nóng)(標準品)Dithianon質(zhì)量規(guī)格:分析標準品

小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP棉隆(標準品)Dazomet質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,97%
Echinoynethiophene A  中文名:  分子式:C13H10O2S    C反應蛋白(CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ecdysterone 20,22-monoacetonide  中文名:  分子式:C30H48O7    豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Dyphylline  中文名:二羥丙茶堿  分子式:C10H14N4O4    豬熱休克蛋白40elisa試劑盒   豬熱休克蛋白40試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豬熱休克蛋白40試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬熱休克蛋白40試劑盒、豬熱休克蛋白40eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

Duloxetine   中文名:鹽酸度洛西汀  分子式:C18H20ClNOS    豬熱休克蛋白20elisa試劑盒   豬熱休克蛋白20試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豬熱休克蛋白20試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬熱休克蛋白20試劑盒、豬熱休克蛋白20eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

裸蓋魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒D-Tryptophan methyl ester   中文名:  分子式:C12H15ClN2O2    豬去甲上腺素elisa試劑盒   豬去甲上腺素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豬去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬去甲上腺素試劑盒、豬去甲上腺素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

聯(lián)系方式
手機:13564080845
手機訪問官網(wǎng)
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