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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BK-P63219 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
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病毒N4亞型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法） |
50T |
BK-P63219 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDKN2A (Cyclin
Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名： 分子式：C16H15NO3
人周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit 2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名： 分子式：C16H15NO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
人周期素依賴性激酶8(CDK8)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDK8 (Cyclin Depende Kinase 8) ELISA Kit 2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester 中文名： 分子式：C26H52O3 度：98.0%
人周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Methoxystypandrone 85122-21-0 中文名： 分子式：C14H12O5 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 虎杖; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人周期素依賴性激酶6(CDK6)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDK6 (Cyclin Depende
Kinase 6) ELISA Kit 2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic
acid 104239-97-6 中文名： 分子式：C19H28INO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) TAK875TAK-875質(zhì)量規(guī)格：>98%,GPR40激動(dòng)劑
氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)GDPNa2;5’-二1酸鳥(niǎo)苷二鈉GDP Di Salt質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR
MAP4K5 Others Human MAP4K5 / MEKKK5 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) SU11274SU-11274質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的Met抑制劑
小鼠;F9尿苷；尿嘧啶核苷Uridine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng)
L6細(xì)胞，大鼠成肌細(xì)胞 低轉(zhuǎn)移細(xì)胞,MHCC97-L細(xì)胞 CL-0120HuH-7(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2尿嘧啶核苷,尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Uridine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
5E Others Human
5E / CD73 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 生長(zhǎng)激素釋放因子-2GHRP-2質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]胰素樣肽-2（1-34)，GLP-2 (1-34) (human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC)(貼壁生長(zhǎng))胰素（1-29），牛，，豬Glucagon (1 - 29), bovine,human, porcine質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
原代滑膜皮細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1ml胰素（19-29），牛，，豬Glucagon (19 - 29), bovine,human, porcine質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B 大鼠頸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL胰素樣肽Ⅰ（7-36）酰胺，Glucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
病毒N4亞型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 26614-48-2 中文名：3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式：C21H32O2 土壤堿性0酸酶（S-AKP/ALP）試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one 2398-63-2 中文名：17-亞乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮 分子式：C21H28O3 土壤纖維素酶（S-CL）測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 3090-70-8 中文名：3-乙酰基-5α-雄烷二醇 分子式：C21H34O3 土壤酶（S-CAT）測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/24樣
17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one 19041-66-8 中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮 分子式：C26H30O3 土壤還原酶（S-）測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
5α-Androstane-3β,17β-diol
571-20-0 中文名：5α-雄烷二醇 分子式：C19H32O2 土壤蔗糖酶(S-SC)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
