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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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腸道病毒70型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P63374
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-12-08
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P63374
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

腸道病毒70PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63374

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,65,43,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminouracil  873-83-6  中文名:6-氨基尿嘧啶  分子式:C4H5N3O2  度:98.0%   

兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Benzyloxypurine  57500-07-9  中文名:6-芐氧基嘌呤  分子式:C12H10N4O 

兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminouracil  873-83-6  中文名:6-氨基尿嘧啶  分子式:C4H5N3O2 

兔子白介素10(IL-10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              6-Benzyloxyindole  中文名:6-芐氧基吲哚  分子式:C15H13NO 

兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminoquinoxaline  中文名:6-氨基喹喔啉  分子式:C8H7N3  度:98.0%
CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 丙位庚內(nèi)酯(Standard for GC ,>98.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC ,>98.5%(GC)γ-Heptalactone

HAL-01 急性混合型細(xì)胞(+)-葑酮(standard for GC, 99.5% (GC))質(zhì)量規(guī)格:standard for GC, 99.5% (GC)(+)-Fenchone

HCT-8 [HRT-18]回盲細(xì)胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%Tricyclazol solution

TNFSF11 Protein Mouse 重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%Trifluralin solution

肺間充質(zhì)干細(xì)胞()(HPMSC)(5×105) U251細(xì)胞 Human草達(dá)津(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Trietazine
CMA1 Others Human  CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 活性炭(電鍍脫色,200,from wood)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:電鍍脫色,200,from wood

草魚腎細(xì)胞;GIK活性炭(催化劑載體,8-16)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:催化劑載體,8-16

T24細(xì)胞,膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 高分化鱗癌細(xì)胞,HCC細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0908活性炭(凈水、氣體化,,φ1.0mm)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:凈水、氣體化,,φ1.0mm

615小鼠滑膜瘤株;ZM755活性炭(凈水、氣體化,10-24)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:凈水、氣體化,10-24

SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 活性炭(電鍍脫色,40-60,from Nutshell)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:電鍍脫色,40-60,from Nutshell
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole  中文名:  分子式:C11H13N3S  度:98.0%  兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名:  分子式:C19H16FNO  度:98.0%  兔子壞死因子α(TNF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T            

3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  中文名:  分子式:C19H15BrFN  度:98.0%  兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒   兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal  中文名:  分子式:C21H16FNO  度:98.0%  兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類elisa試劑盒   兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來腸道病毒70型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒、兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

Pitavastatin ethyl ester  中文名:  分子式:C27H28FNO4  度:98.0%  兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3elisa試劑盒   兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒、兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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