產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63753 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
人類病毒8型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63753 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Fingolimod 162359-55-9 中文名:芬戈莫德 分子式:C19H33NO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Dehydroepiandrosterone acetate 853-23-6 中文名:醋酸去氫表雄酮 分子式:C21H30O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T Dehydroadynerigenin β-neritrioside 中文名: 分子式:C42H62O17 度:96.0%
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T Dregeoside Ga1 98665-66-8 中文名: 分子式:C49H80O17
小鼠骨成型蛋白-2 英文名稱:
Bone morphogenetic protein-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BMP-2
Dehydroadynerigenin glucosyldigitaloside 中文名: 分子式:C36H52O13 度:98.5%
A375細(xì)胞,惡性色素瘤細(xì)胞 糞腸球菌 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480]妥布霉素質(zhì)量規(guī)格:≥900μg/mg,USP33,BRTobramycin Base
ANGPTL2 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)妥布霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價測定Tobramycin Base
KLE(內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 DLL1 / Delta-like 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羅漢樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8石蕊質(zhì)量規(guī)格:ARLitmus
PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7-O-甲基蘆薈新甙A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品7-O-Methylaloeresin A
Loo細(xì)胞,細(xì)胞 色素瘤細(xì)胞,HS-6細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞(拉祜族);KM9406鈣黃綠素乙酰甲酯Calcein-AM 質(zhì)量規(guī)格:>95%,美國進(jìn)口原裝
Hacat(永生化角質(zhì)形成細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2煙酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99.5%,標(biāo)準(zhǔn)品
CD80 Others Human B7-1 / CD80 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雪膽素甲(標(biāo)準(zhǔn)品)cucurbitacins質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-175-羥色胺酸(標(biāo)準(zhǔn)品)5-Hydroxytryptophan(5-HTP)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RNASE1 Others Human RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-羥色胺酸(5-HTP)5-Hydroxytryptophan質(zhì)量規(guī)格:>98%,混旋
7-Amino-4-methylcoumarin 26093-31-2
中文名:7-氨基-4-甲基 分子式:C10H9NO2 度:98.0% 小鼠細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISAKit ELISA.
96T/48T
7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid 22252-43-3 中文名: 分子式:C8H10N2O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
7-Acetoxy-4-methylcoumarin 2747/5/9 中文名:7-乙酰氧基-4-甲基 分子式:C12H10O4 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one 73942-87-7 中文名: 分子式:C12H13NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 36450-02-9 中文名:6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 菜豆; 櫟木; 接骨木屬; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
人類病毒8型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)實(shí)時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR