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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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基孔肯雅病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63604
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-12-01
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63604
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

基孔肯雅病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63604

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記 6 個離心管,分別為 76,54,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠GATA結(jié)合蛋白elisa試劑盒   小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠GATA結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠GATA結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone  3669-41-8  中文名:2,4-二羥基苯基芐酮  分子式:C14H12O3  度:98.0%   

小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Benzoyl-L-histidine  5354-94-9  中文名:苯甲?;?span>-L-組氨酸  分子式:C13H13N3O3  度:98.0%   

小鼠Fractalkinemouse Fractalkine   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid  中文名:  分子式:C18H27N3O4S 

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大鼠腦動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL直接黃12質(zhì)量規(guī)格:>70%,BSChrysophenine

RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS肉桂酰胺(>98%BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCinnamamide

IFNA7 Protein Human 重組 Ierferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)奈韋拉平質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP30,BRNevirapine

MDA-MB-436(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纖維細(xì)胞)奈韋拉平(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Nevirapine

II型肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)磺胺甲惡唑質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,ARSulfamethoxazole(SMZ)
HCT-15 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞構(gòu)樹堿A(標(biāo)準(zhǔn)品) Broussonetine A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SK-NEP-1腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBSOleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (12)-α-L-arabinopyranosideOleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (12)-α-L-arabinopyranoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CD40LG Protein Human 重組 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標(biāo)簽)Sapindoside ASapindoside A質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠腦膜細(xì)胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠*瘤細(xì)胞 Mouse卡博替尼蘋果酸鹽 ;XL184(S)-malateCabozantinib (S)-malate(BMS907351-(S)-malate)質(zhì)量規(guī)格:>99%,廣譜酪氨酸激酶抑制劑

胚腎細(xì)胞;2V6.11Presapogenin CP4Presapogenin CP4質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
6-Aminonicotinic acid  中文名:6-氨基煙酸  分子式:C6H6N2O2  度:98.0%  小鼠抗小核糖核蛋白/SM抗體   英文名稱:   Mouse Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide/Sm   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   sNP/SM

3-Amino-2-naphthoic acid  中文名:3-氨基-2-萘甲酸  分子式:C11H9NO2  度:98.0%  小鼠超氧化物歧化酶   英文名稱:   Mouse Superoxide Dismase   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   SOD

(S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式:C17H21NO  度:99.0%  小鼠素釋放素受體(GHRELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4-Amino-N-methylbenzamide  中文名:4-氨基-N-甲基苯甲酰胺  分子式:C8H10N2O  度:98.0%  小鼠激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

基孔肯雅病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)6-Aminoindole  中文名:6-氨基吲哚  分子式:C8H8N2  度:98.0%  小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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