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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠補(bǔ)體片斷*(C*)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Hemapolin  中文名：甲基環(huán)硫雄醇中間體 E  分子式：C20H32OS 

小鼠補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Cilnidipine  132203-70-4  中文名：西尼地平  分子式：C27H28N2O7  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Cilnidipine  132203-70-4  中文名：西尼地平  分子式：C27H28N2O7 

小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Hemapolin  4267-80-5  中文名：甲基環(huán)硫雄醇中間體 E  分子式：C20H32OS  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Cialis  中文名：西力士  分子式：C22H19N3O4  度：98.0%
FCGR2 Others Mouse 小鼠 CD32 / FCGR2B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酸棗仁皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Jujuboside A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PK(15) 豬腎細(xì)胞D-山梨醇D-Sorbitol質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wildn-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP)N-Octyl-β-D-glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格：>98%,用于蛋白分析

GBC-SD, 細(xì)胞L-核糖L-(+)-Ribose質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

低分化;GLC-82 [GLC82] 大鼠食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLL-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)L-(+)-Ribose質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IGSF11 Others Human  IGSF11 / BTIGSF 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 細(xì)辛脂素（標(biāo)準(zhǔn)品）L-Asarinin/ (-)-asarinin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

MDA-MB-231 癌細(xì)胞大黃酚-8-O-葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

SK-BR-3腺癌細(xì)胞 SK-BR-3 human breast adenocarcinoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS金合歡素;刺槐素（標(biāo)準(zhǔn)品）Acacetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白氯化木蘭花堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Escholine chloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2 肺泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL蒲公英甾醇乙酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）taraxasteryl acetate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
2-Amino-4-methylbenzothiazole  1477-42-5  中文名：2-氨基-4-甲基苯并噻唑  分子式：C8H8N2S  度：98.0%      小鼠環(huán)0酸鳥苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cGMP

2-Amino-4'-fluorobenzophenone 3800/6/4  中文名：  分子式：C13H10FNO  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子   英文名稱：   ciliary neuroophic factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CF

2-Amino-4-chlorobenzothiazole  19952-47-7  中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    白細(xì)胞分化抗原14   英文名稱：   cluster of differeiation aigen 14   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CD14

2-Amino-3-methylbenzoic acid  4389-45-1  中文名：2-氨基-3-甲基苯甲酸  分子式：C8H9NO2  度：98.0%      可溶性細(xì)胞表面分化抗原40配體   英文名稱：   Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   sCD40L

牛病毒PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）2-Amino-3-hydroxyanthraquinone  117-77-1  中文名：2-氨基-3-羥基蒽醌  分子式：C14H9NO3  度：98.0%      小鼠環(huán)孢素Aelisa試劑盒   小鼠環(huán)孢素A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠環(huán)孢素A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠環(huán)孢素A試劑盒、小鼠環(huán)孢素Aeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。