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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠核因子κ B調(diào)控抑制蛋白   英文名稱：   Mouse Inhibitor κ Binding   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   IKBA  Fenazox  61618-27-7  中文名：氨芬酸鈉  分子式：C15H14NNaO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠核因子kb（NF-kb）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dexmedetomidine   中文名：鹽酸右美托咪定  分子式：C13H17ClN2  度：98.0%

小鼠合成酶elisa試劑盒   小鼠合成酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠合成酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠合成酶試劑盒、小鼠合成酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  N-(4-Cyanophenyl)glycine  中文名：  分子式：C9H8N2O2  度：98.0%

小鼠合成酶(NOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           N-(Quinoxalin-2-yl)-4-(quinoxalin-2-ylamino)benzenesulfonamide  NO  中文名：  分子式：C22H16N6O2S 

小鼠合成酶(NOS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  N-(2-Methyl-5-nitrophenyl)-4- (pyridin-3-yl)pyrimidin-2-amine  中文名：  分子式：C16H13N5O2  度：98.0%
CCL22 Protein Human 重組 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)靈芝酸I(標(biāo)準(zhǔn)品)Ganoderic acid I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) TG100-115TG100-115質(zhì)量規(guī)格：>98%,PI3Kγ/δ抑制劑

低分化;GLC-82 [GLC82]鹽酸地芬尼多（標(biāo)準(zhǔn)品）Difenidol 質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用

毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 )鹽酸烏拉地爾Urapidil 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CL-0463UM-UC-3(膀胱移行細(xì)胞癌)5×106cells/瓶×2鹽酸烏拉地爾（標(biāo)準(zhǔn)品）Urapidil 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
MCF-7(MCF7)(ATCC來(lái)源), 癌細(xì)胞溴化乙錠(EB)Ethidium bromide(EB)質(zhì)量規(guī)格：>95%

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0908 破骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL貝西沙星鹽酸鹽Besifloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE甜菜堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Betaine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

FUCA1 Others Human  FUCA1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甜菜堿Betaine質(zhì)量規(guī)格：>99%,無(wú)水高

腎上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)尿酸Uric acid質(zhì)量規(guī)格：0.99
Ambroxol   23828-92-4  中文名：鹽酸氨溴索  分子式：C13H19Br2ClN2O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠類生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3   英文名稱：   insulin-like growth factors binding protein-3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   IGFBP-3

Ambrisentan  177036-94-1  中文名：安倍生坦  分子式：C22H22N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Altrenogest  850-52-2  中文名：烯丙孕素  分子式：C21H26O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

alpha-Terthienylmethanol  13059-93-3  中文名：  分子式：C13H10OS3  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

鉤端螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）Aloin  8015-61-0  中文名：蘆薈苷  分子式：C21H22O9  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  蘆薈; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T