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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)(快檢)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P63684
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-30
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P63684
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)(快檢)

50T

BK-P63684

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Cerebroside D  113773-89-0 中文名:腦苷脂D 分子式:C43H81NO9

小鼠白介素9(IL-9)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Cefquinome  84957-30-2 中文名:頭孢喹咪 分子式:C23H24N6O5S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:

小鼠白介素-9 英文名稱: ierleukin-9 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): IL-9  Cefozopran   113981-44-5 中文名:鹽酸頭孢唑蘭 分子式:C19H18ClN9O5S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:

小鼠白介素-8(mouse IL-8) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Cefcapene pivoxil 中文名:鹽酸頭孢卡品酯 分子式:C23H32ClN5O9S2 度:98.0%

小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Cerebroside B 中文名:腦苷酯B 分子式:C41H77NO9 度:97.0%
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 卡格列凈半水;坎格列凈半水Canagliflozin hemihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,高效的選擇性亞型2-葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SGLT2) 抑制劑

皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4dT1酰胺單體dT Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格:>98%

SUNE-1亞株-5-8F細(xì)胞,細(xì)胞系 小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,B16F10細(xì)胞 CM-H039小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL5--5-脫氧環(huán)1腺苷5'-Iodo-5'-deoxy Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

NRK(大鼠腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22-疊氮腺苷2-Azido Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml2',3'-亞異丙基腺苷2',3'-Isopropylidene Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
IFI30 Others Human  IFI30 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 外消旋西他列汀rac-Sitagliptin質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1酸西他列汀Sitagliptin Phosphate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

JeKo-1套細(xì)胞瘤細(xì)胞 JeKo-1 human male cell lymphoma cells IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS西他列汀N-硫酸鹽Sitagliptin N-Sulfate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

IGFBP1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)西他列汀氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Sitagliptin Carbamoyl β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

H22(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠顆粒細(xì)胞MGC壯觀霉素鹽酸鹽Spectinomycin 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名: 分子式:C8H16O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1-Testosterone 1965/6/5  中文名:1- 分子式:C19H28O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1-O-Methylnataloe-emodin  103392-51-4  中文名: 分子式:C16H12O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠固 英文名稱: Aldosterone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): ALD

1-Naphthol  90-15-3  中文名: 分子式:C10H8O 度:96.0% 小鼠白蛋白 英文名稱: Albumin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): ALB

1-Monopalmitin  542-44-9  中文名:1-棕櫚酸單甘油酯 分子式:C19H38O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠乙酰輔酶A羧化酶 英文名稱: Mouse Acetyl Coenzyme A Carboxylase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): ACC

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)(快檢)主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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門氏菌   

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