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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠甲基化酶elisa試劑盒 小鼠甲基化酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠甲基化酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠甲基化酶試劑盒、小鼠甲基化酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Ergosterol peroxide  2061-64-5 中文名：過氧化麥角甾醇 分子式：C28H44O3

小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Donepezil   120011-70-3 中文名：鹽酸多奈哌齊 分子式：C24H30ClNO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：

小鼠甲基化酶(Methylase)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              cis-Octahydro-isoindole 中文名： 分子式：C8H15N

小鼠己糖激酶elisa試劑盒 小鼠己糖激酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠己糖激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠己糖激酶試劑盒、小鼠己糖激酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Ketoprofen  22071-15-4  分子式：C16H14O3 度：99.0%

小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Donepezil   120011-70-3 中文名：鹽酸多奈哌齊 分子式：C24H30ClNO3
MDA-MB-157細(xì)胞，癌細(xì)胞 胎盤絨膜癌細(xì)胞,BeWo細(xì)胞 肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPASMC miRNA5 μg桿菌肽鋅Bacitracin 質(zhì)量規(guī)格：≥60U/mg,USP,BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng)

恒河猴腎細(xì)胞;MMK2阿西美辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Acemetacin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EPHB6 Others Human  EphB6 / EPHB6 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丙嗪Chlorpromazine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%

肺間充質(zhì)干細(xì)胞總RNAHPMSC NA丙嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Chlorpromazine HCl質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(MH-h)(1×106)地紅霉素Dirithromycin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
NCI-N87 [N87]細(xì)胞 細(xì)胞，Ec109細(xì)胞 MG-63(細(xì)胞)鹽酸多奈哌齊-13C3Donepezil-13C3 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

細(xì)胞;NCI-H16505-O-去甲多奈哌齊5-O-Desmethyl Donepezil質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

APOH Others Human  APOH / B2G1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二氫多奈哌齊（非對映）Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-LuDehydrodeoxy多奈哌齊（多奈哌齊雜質(zhì)）Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CD63 Others Rat 大鼠 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 脫氧鹽酸多奈哌齊Deoxy Donepezil 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
Capecitabine 2',3'-diacetate  162204-20-8  中文名： 分子式：C19H26FN3O8 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 線粒體解偶聯(lián)蛋白2 英文名稱： Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： UCP2

Capecitabine  154361-50-9  中文名：卡培他濱 分子式：C15H22FN3O6 度：98.0% 關(guān)鍵詞 小鼠細(xì)胞粘附分子-1 英文名稱： vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： VCAM-1

Canrenone  976-71-6  中文名：坎利酮 分子式：C22H28O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠鳥酸脫羧酶 英文名稱： Mouse Ornithine Decarboxylase 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ODC

Candesartan methyl ester  139481-69-9  中文名： 分子式：C25H22N6O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠卵清蛋白特異性IgE 英文名稱： Mouse ovalbumin specific Immunoglobulin E 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： OVA sIgE

幽門螺桿菌克拉霉素耐藥基因PCR檢測試劑盒（熒光 PCR 法）Candesartan ethyl ester  139481-58-6  中文名： 分子式：C26H24N6O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠氧化 英文名稱： Mouse oxidized Low Density Lipoprotein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： oxLDL