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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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Q熱立克次體PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63656
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-23
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63656
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

Q熱立克次體PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63656

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,6,54,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Bis(carboxymethyl) trithiocarbonate  中文名:雙(羧甲基)三硫代碳酸鹽  分子式:C5H6O4S3  度:98.0%

小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Fumaric acid  110-17-8  中文名:  分子式:C4H4O4  度:關鍵詞:  ; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

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小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Bisoprolol fumarate  中文名:富馬酸比索洛爾  分子式:C22H35NO8 

小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Ezetimibe  BBP80298  中文名:依澤替米貝  分子式:C24H21F2NO3  度:98.0%  關鍵詞:
CM-M115小鼠小梁網(wǎng)細胞完全培養(yǎng)基100mLD-環(huán)絲氨酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:標準品用于含量測定D-Cycloserine

M2e細胞,細胞 腸系膜下腔動脈內(nèi)皮細胞,Ealy926細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1鹽酸四環(huán)素質(zhì)量規(guī)格:Purity>98%,Potency900μg/mg, USP gradeTetracycline

C6(大鼠細胞) 5×106cells/瓶×2他唑巴坦(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品Tazobactam Acid

CEACAM1 Others Human  CEACAM1 / CD66a 細胞裂解液 (陽性對照) NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRβ-Nicotinamide adenine dinucleotide hydrate(β-NAD)

tTA基因修飾的小鼠*癌細胞(B);Pan02-CAG-tTA-2D1NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRβ-Nicotinamide adenine dinucleotide
HIT-T15 敘利亞倉鼠胰島β細胞金胺OAuramine O 質(zhì)量規(guī)格:BS

CM-R035大鼠肝動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL2,3-二丙磺酸鈉 2,3-dimercapto-1-propanesulfonate質(zhì)量規(guī)格:>98%

THP-1單核細胞硫酸鈰銨Ammonium ceric sulfate質(zhì)量規(guī)格:AR,>98%

EB病毒轉化的B細胞;KMY1002 神經(jīng)元細胞完全培養(yǎng)基 100mL硫代乙酰胺Thioacetamide質(zhì)量規(guī)格:AR, 99.0%

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Tofacitinib   中文名:枸櫞酸托法替尼  分子式:C22H28N6O8  度:98.0%  小鼠病毒(PVMELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Fosaprepitant dimeglumine  中文名:  分子式:C30H40F7N6O10P  度:98.0%  小鼠肺表面活性物質(zhì)相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Pazopanib  中文名:帕唑帕尼  分子式:C21H23N7O2S  度:98.0%  小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Q熱立克次體PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate  中文名:卡培他濱  分子式:C16H20FN3O7  度:98.0%  小鼠防御素A2   英文名稱:   Mouse Defensins A2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   DA2

Irbesartan  中文名:厄貝沙坦  分子式:C25H28N6O  度:98.0%  小鼠內(nèi)   英文名稱:   Mouse Endotoxin   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   EDT

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