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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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霍亂弧菌ctxB基因PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
起訂量 (盒)價格
1-104899 /盒
≥102899 /盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63452
  • 發(fā)布日期: 2020-11-22
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63452
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

霍亂弧菌ctxB基因PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63452

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記 6 個離心管,分別為 76,54,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

兔子血小板活化因子elisa試劑盒   兔子血小板活化因子試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔子血小板活化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板活化因子試劑盒、兔子血小板活化因子eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。     Adefovir  中文名:阿德福韋  分子式:C8H12N5O4P 

兔子血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Methyl-3-nitrophthalate  21606-04-2  中文名:  分子式:C9H7NO6  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Acyclovir  59277-89-3  中文名:阿昔洛韋  分子式:5O3  度:99.0%  關(guān)鍵詞: 

兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Acetylatractylodinol  61582-39-6  中文名:乙酰蒼術(shù)素醇  分子式:C15H12O3 

兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Indanamine   中文名:  分子式:C9H12ClN  度:98.0%
CD200R1L Others Human  CD200R1L / CD200R2 / CD200RLa 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿奇霉素Azithromycin質(zhì)量規(guī)格:945-1030 ug /mg,二水物

角膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)阿奇霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Azithromycin質(zhì)量規(guī)格:效價測定

CST7 Others Mouse 小鼠 Cystatin 7 / CST7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-氨基水楊酸,美沙拉秦5-Aminosalicylic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

大鼠平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸喹那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)Quinapril 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定

NRK-52E大鼠腎細(xì)胞 In NRK-52E rat kidney cells DMEM培養(yǎng)基+5%FBS愛普列特(標(biāo)準(zhǔn)品)Epristeride質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KM933 髂動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL西紅花苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)Crocin II質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

胎牛血清FBS細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Tenuifolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

IL21R Others Rat 大鼠 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 仙鶴草酚B(標(biāo)準(zhǔn)品)Agrimol B質(zhì)量規(guī)格:TLC鑒別用

脈絡(luò)膜微細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Sanguinarine質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

S180細(xì)胞,小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞TCM15 MCF-7(癌細(xì)胞) 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A香草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Vanillic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
cis-Octahydro-isoindole  中文名:  分子式:C8H15N  度:98.0%  小鼠16α羥基雌1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-Benzylsuccinic acid  中文名:  分子式:C11H12O4  度:98.0%  小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid  中文名:  分子式:C17H23NO5  度:98.0%  小鼠11β羥基類固醇脫氫酶(11β-HSD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Atorvastatin calcium  中文名:阿托伐他汀鈣  分子式:C33H35FN2O5  度:98.0%  小鼠1,4,5-0酸肌醇(IP3ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

(2R,3S)-3-Phenylisoserine ethyl ester  中文名:  分子式:C11H15NO3  度:98.0%  小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

霍亂弧菌ctxB基因PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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