產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63821 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
MTHFR和MTRR基因檢測試劑盒 |
50T |
BK-P63821 |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠甲狀腺過氧化物酶elisa試劑盒 小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒、小鼠甲狀腺過氧化物酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Doxifluridine 3094/9/5 中文名: 分子式:C9H11FN2O5
小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Doxycycline 564-25-0 中文名:多西環(huán)素 分子式:C22H24N2O8
小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISAKit ELISA. 96T/48T Doxapram monohydrate 中文名:鹽酸多沙普侖 分子式:C24H33ClN2O3 度:98.0%
小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白elisa試劑盒 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒、小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Dorzolomide 中文名:鹽酸多佐胺 分子式:C10H17ClN2O4S3 度:98.0%
小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISAKit ELISA.
96T/48T
Deflazacort 14484-47-0 中文名:地夫可特 分子式:C25H31NO6
FCGR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32b / FCGR2B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]-
a-L-阿拉伯糖 23-羥基羽扇豆20(29)-1-28–酸;白頭翁皂苷DV質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HBMEC 腦微內(nèi)皮細(xì)胞羅漢果皂苷IvaMogroside IVa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K13A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-β-環(huán)糊精水合物(>97.0%(T))3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-β-cyclodextrin Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
lovo, 細(xì)胞3A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-α-環(huán)糊精水合物(>90.0%(HPLC))3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-α-cyclodextrin Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)
癌細(xì)胞;MDA-MB-157 大鼠小腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-γ-環(huán)糊精水合物(>95.0%(HPLC))3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-γ-cyclodextrin Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
NP Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去甲基鹽酸左氧氟沙星Desmethyl
Levofloxacin 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠前低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFP左氧氟沙星Levofloxacin質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 色素瘤細(xì)胞,B16細(xì)胞 Pr-HNV8細(xì)胞,菜青蟲卵巢細(xì)胞左氧氟沙星-d8Levofloxacin-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA5-羥基氯諾昔康5-Hydroxy Lornoxicam質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
KNG1 Others Mouse 小鼠 KNG1 / BDK / kininogen-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯諾昔康-d4Lornoxicam-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Cefixime
79350-37-1 中文名:頭孢克肟 分子式:C16H15N5O7S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血酶敏感蛋白-1 英文名稱: thrombospondin 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TSP-1
Cefcapene pivoxil 147816-24-8 中文名:鹽酸頭孢卡品酯 分子式:C23H32ClN5O9S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠調(diào)節(jié)蛋白 英文名稱: thrombomodulin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TM
Caudatin 38395-02-7 中文名:告達(dá)庭 分子式:C28H42O7 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 小鼠TH糖蛋白 英文名稱: Mouse Tamm Horsfall Protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: THP
Catalponol methylthiomethyl ether 1432057-74-3 中文名: 分子式:C17H22O2S 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 四氫萘酮; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗酸性0酸酶5 英文名稱: Mouse Tarate Resista Acid Phosphatase 5 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: AP 5
MTHFR和MTRR基因檢測試劑盒)Catalponol 34168-56-4 中文名: 分子式:C15H18O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 梓; 四氫萘酮; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝