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實(shí)驗(yàn)注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

山梨醇含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣  3-Aminopiperidine di  334618-23-4  中文名：  分子式：C5H14Cl2N2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

色素上皮細(xì)胞衍生因子 (PEDF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Peri acid  82-75-7  中文名：周位酸  分子式：C10H9NO3S  度：98.0%   

傘形   10g  4-Aminobenzophenone  中文名：4-氨基二苯甲酮  分子式：C13H11NO  度：99.0%

三乙酸   100g  3-Aminoadamantan-1-ol  702-82-9  中文名：  分子式：C10H17NO  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

三0酸腺苷酶   英文名稱：   Rat Adenosine iphosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ATP  3-Amino-5-phenylpyrazole 1572-10-7  中文名：3-氨基-5-苯基吡唑  分子式：C9H9N3  度：98.0%
CCL5 Others Human  CCL5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) B質(zhì)量規(guī)格：ARSudan Red B/Solvent Red 25

大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-67B/溶劑紅19/脂肪紅7B質(zhì)量規(guī)格：BSSudan Red 7B/Solvent Red 19

NEK3 Others Mouse 小鼠 NEK3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 100)質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 100Vacuum pump oil

CM-M119小鼠晶狀體上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 150)質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 150Vacuum pump oil

SKOV3/Taxol-25, 紫杉醇耐藥細(xì)胞株 單核細(xì)胞型瘤細(xì)胞,THP 1細(xì)胞 FaDu(咽鱗癌細(xì)胞)紫尿酸 一水合物(97%)質(zhì)量規(guī)格：0.97Violuric acid monohydrate
ACY1 Others Mouse 小鼠 ACY1 / Aminoacylase-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯化熒光素(>90.0%(HPLC))Fluorescein Chloride 質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)

*成纖維細(xì)胞總RNAHCF NA2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))2',7'-Dichlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)

CROT Others Human  CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T))2,3-Diaminonaphthalene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)

敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1溴甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N))Dimidium Bromide質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(N)

SMMC-7721細(xì)胞，細(xì)胞 羊膜細(xì)胞系,Wish細(xì)胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C117-(二甲基氨基)-4-甲基(>95.0%(GC)(T))7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)
Caudatin  中文名：告達(dá)庭  分子式：C28H42O7  度：98.5%  兔單核細(xì)胞趨化蛋白-1(rabbit MCP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Ponasterone A  中文名：坡那甾酮A  分子式：C27H44O6  度：98.0%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶-1(rabbit MMP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Stigmasta-5,8-dien-3-ol  中文名：  分子式：C29H48O  度：%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶-2(rabbit MMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

乙型病毒Victoria/YamagataPCR檢測試劑盒（熒光PCR法）Tenacissoside F  中文名：通關(guān)藤苷F  分子式：C35H56O12  度：%  兔肌鈣蛋白Ⅰelisa試劑盒   兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒、兔肌鈣蛋白Ⅰ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Ergosterol peroxide  中文名：過氧化麥角甾醇  分子式：C28H44O3  度：96.0%  兔環(huán)0酸腺苷elisa試劑盒   兔環(huán)0酸腺苷試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔環(huán)0酸腺苷試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔環(huán)0酸腺苷試劑盒、兔環(huán)0酸腺苷elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。