產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4551 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
黃頭病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Yellow Head Virus(YHV)RTPCR | BKP4551 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:黃頭病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Chrysophanol 481-74-3 中文名:大黃酚 分子式:C15H10O4 Humandopaminedecarboxylase,DDCELISA試劑盒人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Chrysophanol 8-O-glucoside 13241-28-6 中文名: 分子式:C21H20O9 組織NEK6激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Rubanthrone A 441764-20-1 中文名: 分子式:C17H14O10 HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Aloin 8015-61-0 中文名:蘆薈苷 分子式:C21H22O9 兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Aurantio-obtusin 67979-25-3 中文名:橙黃決明素 分子式:C17H14O7 People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒E
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Bindone 中文名:雙茚二酮 分子式:C18H10O3 度:98.0%
小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISAKit ELISA. 96T/48T Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane 105391-33-1 中文名:雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來(lái)基苯基)甲烷 分子式:C27H26N2O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠α2抗纖溶酶elisa試劑盒 小鼠α2抗纖溶酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠α2抗纖溶酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠α2抗纖溶酶試劑盒、小鼠α2抗纖溶酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Bindone 1707-95-5 中文名:雙茚二酮 分子式:C18H10O3 度:98.0%
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bi-linderone 1227375-09-8 中文名: 分子式:C34H32O10 度:96.5% 關(guān)鍵詞: 山胡椒屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
小鼠α1微球蛋白elisa試劑盒 小鼠α1微球蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠α1微球蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠α1微球蛋白試劑盒、小鼠α1微球蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Enrofloxacin 93106-60-6 中文名:恩諾沙星 分子式:C19H22FN3O3 度:98.0%
黃頭病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6aR,11aR)3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan
間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基MCDM千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Oroxyloside
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3 細(xì)胞,Hela細(xì)胞 HEL299(紅白細(xì)胞細(xì)胞)甲殼素;幾丁質(zhì)質(zhì)量規(guī)格:BRChitin
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0910輔酶 A質(zhì)量規(guī)格:>85%,BRCoenzyme A, free acid, hydrate (COA)
MESDC2 Others Human 人 MESDC2 / MESD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 多效唑質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPaclobutrazol
NRL1 化大家鼠肺成纖維樣細(xì)胞阿糖腺苷一水物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Vidarabine Monohydrate
大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1鹽酸倍他司汀-d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Betahistine-d3 Dihydrochloride
Ishikawa, 人細(xì)胞系倍他司汀一鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Betahistine Hydrochloride
人細(xì)胞;SF767 大鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL倍他司汀-d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口β-Histine-d3
腎系膜細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MCGS阿卡地新(AICAR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAcadesine