產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4529 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒直銷 | Vibrio parahemolyticusPCR | BKP4529 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Candesartan ethyl ester 中文名: 分子式:C26H24N6O3 度:98.0% 小鼠P物質(zhì)elisa試劑盒 小鼠P物質(zhì)試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠P物質(zhì)試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠P物質(zhì)試劑盒、小鼠P物質(zhì)eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid 中文名: 分子式:C8H10N2O3S 度:98.0% 小鼠p53elisa試劑盒 小鼠p53試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠p53試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠p53試劑盒、小鼠p53eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Candesartan methyl ester 中文名: 分子式:C25H22N6O3 度:98.0% 小鼠N端前腦素elisa試劑盒 小鼠N端前腦素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠N端前腦素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠N端前腦素試劑盒、小鼠N端前腦素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Ethyl 2-ethoxy-1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-1H-benzimidazole-7-carboxylate 中文名: 分子式:C26H23N3O3 度:98.0% 小鼠L選擇素elisa試劑盒 小鼠L選擇素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠L選擇素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠L選擇素試劑盒、小鼠L選擇素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:C23H19N3O4 度:98.0% 小鼠P物質(zhì) 英文名稱: Substance P 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Substance P
小鼠CD3分子(CD3)ELISAKit ELISA. 96T/48T Benzofuroxan 480-96-6 中文名:苯并呋咱 分子式:C6H4N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠CD34(mouse CD34) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Benzo-18-crown-6 ether 14098-24-9 中文名:苯并-18-冠6-醚 分子式:C16H24O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠CD30分子(CD30)ELISAKit ELISA. 96T/48T Dehydroherbarin 36379-74-5 中文名: 分子式:C16H14O5
小鼠CD163分子(CD163)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Benzoin methyl ether 中文名:安息香甲基醚 分子式:C15H14O2 度:98.0%
小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Benzoin methyl ether 中文名:安息香甲基醚 分子式:C15H14O2
副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒直銷HEL細(xì)胞,紅細(xì)胞 人系,PG49細(xì)胞 細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鉻天青S(Ind Grade)質(zhì)量規(guī)格:Ind GradeCAS, Chrome azurol S
狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome5'-三1酸胞苷二鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)Cytidine-5'-triphosphate (CTP), di salt
RK3 Others Human 人 kC / RK3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 纖維素酶(酶活>45 U/mg)質(zhì)量規(guī)格:酶活>45 U/mg,BCCellulase
CL-0272EA.hy926(人臍細(xì)胞融合細(xì)胞)5×106cells/瓶×2DL-脯氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.99DL-Proline
HA Others H6N4 甲型 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:0.98DL-Alanine methyl ester hydrochloride
SK-MEL-1(人皮膚色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2TAPS;N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)TAPS
HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7PI3K 抑制劑質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,進(jìn)分LY294002
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med羥乙基磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98.5%SHES
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羥乙基醋酸鉀質(zhì)量規(guī)格:>98.5%PHES
MGC-803 人細(xì)胞[Tyr8]緩激肽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Tyr8] Bradykinin
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。