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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4550 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Yellow Fever Virus(YFV)RTPCR
【貨號】: BKP4550
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Cholesterol 57-88-5 中文名：膽固醇 分子式：C27H46O 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorpheniramine maleate 113-92-8 中文名：馬來酸氯苯那敏 分子式：C20H23ClN2O4 度：98.0% 小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorotetracycline 57-62-5 中文名：金霉素 分子式：C22H23ClN2O8 度：98.0% 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorogenic acid 327-97-9 中文名：綠原酸 分子式：C16H18O9 度：98.0% 關(guān)鍵詞： *; 抗氧化; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Chlorhexidine acetate 56-95-1 中文名：醋酸氯己定 分子式：C26H38Cl2N10O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bi-linderone 1227375-09-8 中文名： 分子式：C34H32O10
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISAKit ELISA. 96T/48T Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate 147118-35-2 中文名： 分子式：C31H39O4PSi 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠α1酸性糖蛋白elisa試劑盒 小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒、小鼠α1酸性糖蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Bindone 1707-95-5 中文名：雙茚二酮 分子式：C18H10O3
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bezafibrate 中文名：苯扎貝特 分子式：C19H20ClNO4 度：98.0%
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Estradiol heptanoate 4956-37-0 中文名：庚酸雌二醇 分子式：C25H36O3
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-三苯甲基羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-Trityl Losartan Carboxylic Acid
CL-0270CRT(人神經(jīng)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2O-乙酰洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口O-Acetyl Losartan
KB-C1.5細(xì)胞，細(xì)胞 人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,Jurkat D,E細(xì)胞 人上皮細(xì)胞;Hep-2洛沙坦N2-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Losartan N2-Glucuronide
769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Losartan
ACVRL1 Others Rat 大鼠 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 洛匹那韋代謝產(chǎn)物M-3/M-4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Lopinavir Metabolite M-3/M-4
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書MIApaca-2細(xì)胞，人細(xì)胞 人成纖維細(xì)胞,HT1080細(xì)胞 615小鼠瘤株;HP615DCCIN，N-二環(huán)己基碳1克AR，99%
HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2流醋鈰;流醋鈰銨 CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1094-4-2
Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml2,5-二本惡唑shēng huà shì jì容量：500毫升
人骨骼肌細(xì)胞裂解物HSkMCLAMMONIUMOXALATEMONOHYDRATE草酸*500G6009-70-7RT
PRKCD Others Mouse 小鼠 PKC delta / PRKCD 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (8-羥基)
PCR檢測試劑盒
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
