產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4455 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
病毒PCR檢測試劑盒供應 | Transmissible Gastroenteritis Virus(TGEV)RTPCR | BKP4455 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Arbidol 131707-23-8 中文名:鹽酸阿比朵爾 分子式:C22H26BrClN2O3S Human pulmonary surfacta associated protein B (SP-B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒
Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid 147027-10-9 中文名: 分子式:C18H27N3O4S rabbittelomerase,TEELISAKit 兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione 144809-28-9 中文名: 分子式:C19H18N2O3S CLIAKitforBDNF(MouseBrainderivedneuroophicfacor)ELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格:48T/96T
Leflunomide 75706-12-6 中文名:來氟米特 分子式:C12H9F3N2O2 細菌總ATP酶(totalATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Lafutidine 118288-08-7 中文名:拉呋替丁 分子式:C22H29N3O4S RabbitD-Dimer,D2DELISAKit兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 中文名: 分子式:C10H14N2O6S3 度:98.0%
兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Adynerigenin β-neritrioside 88721-09-9 中文名: 分子式:C42H64O17
兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate 340702-68-3 中文名: 分子式:C50H93NO9 度:96.0% 關鍵詞: 神經(jīng)酰胺; 腦苷脂; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Adrenosterone 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3 度:99.0%
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISAKit ELISA. 96T/48T Adrenosterone 382-45-6 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3 度:99.0% 關鍵詞:
病毒PCR檢測試劑盒供應IL1B Protein Rat 重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form)L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Proline benzyl ester hydrochloride
NCI-H524(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人臍內(nèi)皮細胞)L-精氨酸-L-谷氨酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Arginine L-glutamate
CL-0336FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2L-精氨酸-α-酮戊二酸鹽(2:1)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Arginine AKG 2:1
CS Others Human 人 Ciate syhase / CS 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸-5-甲酯質(zhì)量規(guī)格:0.98L-Glutamic acid 5-methyl ester
人腸平滑肌細胞總RNAHISMC NAN-乙酰-L-亮氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%N-Acetyl-L-leucine
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SH-SY5Y 人牙周膜成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL2,5-二溴硒酚(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,5-Dibromoselenophene
人小腦顆粒細胞cDNAHCGC cDNA2,6-二溴萘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,6-Dibromonaphthalene
CDH1 Others Mouse 小鼠 CDH1 / E-cad / CD324 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二溴-7-叔丁基芘(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene
Ana-1 小鼠巨噬細胞6,12-二溴屈(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)6,12-Dibromochrysene
CL-0198RM-1(小鼠細胞)5×106cells/瓶×22',3'-二脫氧尿苷(ddU)質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分2',3'-Dideoxyuridine
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。