產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4466 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鄉(xiāng)土旋毛蟲PCR檢測試劑盒說明書 | Trichinella nativaPCR | BKP4466 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:鄉(xiāng)土旋毛蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Averantin 中文名: 分子式:C20H20O7 總蛋白定量測試盒(帶標(biāo)準(zhǔn);考馬斯亮蘭法) Total protein quaitative test kit (with standard; Coomassie brillia blue method)
Avanafil 中文名:阿伐那非 分子式:C23H26ClN7O3 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(總蛋白、白蛋白) Protein standard (total protein, albumin)
Aurantio-obtusin 中文名:橙黃決明素 分子式:C17H14O7 微量游離血紅蛋白測試盒 ace free hemoglobin test case
Atrazine 中文名:阿特拉津 分子式:C8H14ClN5 總谷胱甘肽(T-GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG)測定試劑盒(微板法)
Atracurium oxalate 中文名:阿曲庫胺草酸鹽 分子式:C53H68N2O16 酸性0酸酶(ACP)測定試劑盒(微板法)
豚鼠白介素12elisa試劑盒 豚鼠白介素12試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠白介素12試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠白介素12試劑盒、豚鼠白介素12eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Allitol 中文名:蒜糖醇 分子式:C6H14O6
豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL12B ELISA Kit 2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone 中文名:2-氨基-2',5-二氯二苯酮 分子式:C13H9Cl2NO 度:99.0%
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-12/P70 ELISA Kit 2-Allylphenol 1745-81-9 中文名:2-烯丙基酚 分子式:C9H10O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Allylestrenol 中文名:烯丙雌醇 分子式:C21H32O
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISAKIT ELISA. 96T/48T Alogliptin 中文名:阿格列汀 分子式:C18H21N5O2
鄉(xiāng)土旋毛蟲PCR檢測試劑盒說明書IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)羅通定/左旋延胡索乙素/左旋四氫巴馬汀質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BRRotundine/ L-Tetrahydropalmatine
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 LX-2, 人肝星形細(xì)胞株利拉萘酯質(zhì)量規(guī)格:>99%,ARLiranaftate
CM-R081大鼠內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甲基反亞油酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Methyl linolelaidate
OLR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 OLR1 / LOX1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肉豆蔻酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Methyl myristate
小鼠背脊髓神經(jīng)元MN-dsc棕櫚酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)Methyl palmitate
CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硼替佐米中間體I質(zhì)量規(guī)格:>97%Bortezomib intermediates I
穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E保特佐米蒎烷二醇酯質(zhì)量規(guī)格:>97%BortezoMib Pinanediol Ester
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲磺司特質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSuplatast tosilate
人腎管狀上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1丙基-α-D-吡喃半乳糖苷質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRAllyl α-D-galactopyranoside
B16F1細(xì)胞,小鼠色素瘤細(xì)胞 MRC-5(胚肺細(xì)胞) Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33醋酸布舍瑞林質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBuserelin Acetate
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。