產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4411 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
無齒類圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Strongyloides edentatusPCR | BKP4411 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:無齒類圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Afatinib 850140-72-6 中文名:阿法替尼 分子式:C24H25ClFN5O3 度:98.0% 小鼠干擾素 - g (mouse IFN- g ) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 法國(guó) Diaclone
Adynerigenin β-neritrioside 88721-09-9 中文名: 分子式:C42H64O17 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠球蛋白 E (mouse IgE) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) ADI
Adrenosterone 382-45-6 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性瘦素受體elisa試劑盒 小鼠可溶性瘦素受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠可溶性瘦素受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠可溶性瘦素受體試劑盒、小鼠可溶性瘦素受體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Adipic dihydrazide 1071-93-8 中文名:己二酸二 分子式:C6H14N4O2 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Adenosine 5'-monophosphate 61-19-8 中文名:5'-腺嘌呤核苷酸 分子式:C10H14N5O7P 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠顆粒酶elisa試劑盒 小鼠顆粒酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠顆粒酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠顆粒酶試劑盒、小鼠顆粒酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol 90695-03-7 中文名: 分子式:C30H50O 度:96.0% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 7-Methoxy-1-naphthaleneacetic acid 6836-22-2 中文名: 分子式:C13H12O3
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISAKit ELISA. 96T/48T 7-Keto-dehydroepiandrosterone 566-19-8 中文名:7-酮基去氫表雄酮 分子式:C19H26O3
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (2-Benzothiazolylthio)acetic acid 中文名:2-(苯并噻唑基硫代)乙酸 分子式:C9H7NO2S2 度:98.0%
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 7-Keto-dehydroepiandrosterone 中文名:7-酮基去氫表雄酮 分子式:C19H26O3 度:98.0%
無齒類圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)LIFR Others Human 人 LIFR / CD118 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,4-二氨基-6-異丙氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)2,4-Diamino-6-isopropoxy-1,3,5-triazine
原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml2,4-二氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)2,4-Diamino-1,3,5-triazine
ROBO4 Others Human 人 ROBO4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,4-氨基-6-甲氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)2,4-Diamino-6-methoxy-1,3,5-triazine
MDCK 狗腎細(xì)胞2,4-二氨基-6-二甲氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)2,4-Diamino-6-dimethylamino-1,3,5-triazine
散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21噴昔洛韋-d4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Penciclovir-d4
THOP1 Others Mouse 小鼠 THOP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 瓊脂粉25克RT,避光
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-11-基苯并三唑 1-Aminobenzotriazole 1614-12-6 100MG 通用試劑
MGC80-3細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞,TU212細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK吲哚-3-全酰錄 INDOLq-3-GLYOXYLYL CHLORIDq 980-09-
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12-N,N-雙(2-乙磺酸)shēng huà shì jì容量:1克
RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鄰本基酚2-pxenylpxenol