產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4407 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
乳房鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Streptococcus uberisPCR | BKP4407 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Adenosine 5'-monophosphate 61-19-8 中文名:5'-腺嘌呤核苷酸 分子式:C10H14N5O7P icine 100g
2-Acetyl-3-ethylpyrazine 32974-92-8 中文名:2-乙?;?/span>-3-乙基吡嗪 分子式:C8H10N2O 三0酸腺苷酶 英文名稱: Rat Adenosine iphosphate 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ATP
2-Amino-6-ethoxybenzothiazole 94-45-1 中文名:2-氨基-6-乙氧基苯并噻唑 分子式:C9H10N2OS 大鼠半胱天冬蛋白酶3 英文名稱: active cysteine-aspaic acid protease-3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Active Caspase-3
N-Acetyl-L-tryptophan 1218-34-4 中文名:N-乙酰-L-色氨酸 分子式:C13H14N2O3 大鼠半胱天冬蛋白酶7 英文名稱: active cysteine-aspaic acid protease-7 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Active Caspase-7
L-Carnosine 305-84-0 中文名:L-肌肽 分子式:C9H14N4O3 大鼠半胱天冬蛋白酶8 英文名稱: active cysteine-aspaic acid protease-8 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Active Caspase-8
兔子紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (-)-Noe's Reagent 108031-79-4 中文名:(-)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑 分子式:C24H38O3 度:98.0%
兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 7-Amino-4-methylcoumarin 中文名:7-氨基-4-甲基香豆素 分子式:C10H9NO2 度:98.0%
兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit ELISA. 96T/48T 9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 中文名: 分子式:C18H30O3 度:95.0%
兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 ((2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide 中文名: 分子式:C37H30BrFNP 度:98.0%
兔子睪酮(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乳房鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)LTBR Others Cynomolgus 食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 帕羅西汀馬來酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Paroxetine maleate
骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯 1,1-二氧化物質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide
U937細(xì)胞,人組織細(xì)胞瘤細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,NS1細(xì)胞 人表皮色素細(xì)胞-淺色素cDNAHEM-l cDNA甲基4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide
NCI-H838(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2去甲基吡羅昔康(吡羅昔康雜質(zhì)B)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B)
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株) 5×106cells/瓶×2 CL-0150MDA-MB-231(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 Walker氏癌256瘤株;W256托品醇(鹽酸托烷司瓊雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用Tropine
MC3T3-E1細(xì)胞,小鼠成骨細(xì)胞系 V79(中國倉鼠肺細(xì)胞) 家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC嶙酰二肽25克
EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)α-溴丁醋酯 2-Bromobutyric ccid mqthyl qstqr 3196/12/4
COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)BOC-L-本100克
人內(nèi)根殼細(xì)胞cDNAHHIRSC cDNA吐溫65100克
CLEC3B Others Human 人 CLEC3B / Teanectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 94-75-72,4-二錄本氧基乙酸2,4-Dichloropxenoxyacetic acid
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:乳房鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。