產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4383 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
尼泊爾葡萄球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Staphylococcus nepalensisPCR | BKP4383 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:尼泊爾葡萄球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 中文名:8-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S Acetosyringone 1g
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 中文名: 分子式:C28H40O3 香草 25g
7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol 中文名: 分子式:C29H46O3 Acetovanillone 50g
7α-Hydroxystigmasterol 中文名:7α-羥基豆甾醇 分子式:C29H48O2 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(ChAT)測定試劑盒(測血清)(紫外比色法)
7α-Hydroxysitosterol 中文名:7α-羥基谷甾醇 分子式:C29H50O2 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(ChAT)測定試劑盒(測組織)(紫外比色法)
兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit ELISA. 96T/48T Adipic dihydrazide 中文名:己二酸二 分子式:C6H14N4O2 度:99.0%
兔乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-O-Ethylcleroindicin D 488138-32-5 中文名: 分子式:C10H16O4 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔乙酰膽堿(ACh)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Benzoyloxy-2-azetidinone 28562-58-5 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮 分子式:C10H9NO3
兔胰淀素(Amylin)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 中文名: 分子式:C9H14O4 度:%
兔樣生長因子1(rabbit IGF-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
尼泊爾葡萄球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)MDA-MB-468-06(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Y1(腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞)氯解1定(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定2-Pyridinealdoxime methochloride
C57小鼠色素瘤瘤株;ME (Me)鹽酸賽庚啶(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE
OLR1 Others Human 人 OLR1 / LOX1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Amidopyrine/aminopyrine
CaEs-17 人細(xì)胞沙利度胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Thalidomide
GBC-SD人細(xì)胞 GBC-SD cells in human gallbladder carcinomas RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽酸塞利洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定Celiprolol hydrochloride
人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1化啶shēng huà shì jì容量:1公斤
人 (HPF)( 5×105 )環(huán)沙星 Ciprofloxacin (HPLC,≥98.0%) 85721-33-1 5G 通用試劑
CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化))5×106cells/瓶×2羌安言醋鹽;言醋羌安;錄化羌銨;輕錄羌安;言醋胲;羌基錄化銨 xy7noxylcMinq xy7nochloridq;xy7noxylcMMoniuM chloridq 2470-11-1
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292 大鼠表皮色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1,1,3,3-四乙氧基shēng huà shì jì容量:0.25毫升
MFC 小鼠細(xì)胞7439-96-5錳粉Manganese
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。