產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4425 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Tacaribe Virus(TCRV)RTPCR | BKP4425 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Aminophenazone 中文名: 分子式:C13H17N3O 脂褐質(zhì)(不包括比色)檢測 Free fatty acids (NEFA) detection
Ambroxol 中文名:鹽酸氨溴索 分子式:C13H19Br2ClN2O 組織因子 英文名稱: tissue factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TF
Ambrisentan 中文名:安倍生坦 分子式:C22H22N2O4 組織因子抑制物 英文名稱: tissue factor protein inhibitor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TFPⅠ
Altrenogest 中文名:烯丙孕素 分子式:C21H26O2 轉(zhuǎn)移生長因子-α 英文名稱: Ttansforming Growth Factor α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TGF-α
alpha-Terthienylmethanol 中文名: 分子式:C13H10OS3 轉(zhuǎn)移生長因子-β1 英文名稱: Ttansforming Growth Factor β1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TGF-β1
兔子球蛋白M(IgM)ELISAKit ELISA. 96T/48T 7-Methoxy-1-tetralinone 6836-19-7 中文名: 分子式:C11H12O2
兔子球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 2479-46-1 中文名:1,3-雙(4-氨苯氧基)苯 分子式:C18H16N2O2 度:98.0%
兔子球蛋白Gelisa試劑盒 兔子球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子球蛋白G試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子球蛋白G試劑盒、兔子球蛋白G elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 8-Hydroxyodoroside A 176519-75-8 中文名: 分子式:C30H46O8 度:96.0% 關鍵詞: 夾竹桃; 強心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子球蛋白Gelisa試劑盒 兔子球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子球蛋白G試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子球蛋白G試劑盒、兔子球蛋白G elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal 59014-02-7 中文名: 分子式:C35H52O5 度:% 關鍵詞: 貫葉連翹; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 8-Phenyloctanoic acid 26547-51-3 中文名:8-苯基辛酸 分子式:C14H20O2
塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒直銷Ke-3 人細胞外消旋馬來酸噻嗎洛爾質(zhì)量規(guī)格:美國進口rac Timolol Maleate
MDA-MB-436人腺癌細胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBS(R)-(+)-馬來酸噻嗎洛爾質(zhì)量規(guī)格:美國進口(R)-(+)-Timolol Maleate
FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 標簽)(S)-(-)-馬來酸噻嗎洛爾質(zhì)量規(guī)格:美國進口(S)-(-)-Timolol Maleate
小鼠雪旺細胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌細胞 Human替硝唑標記d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口Tinidazole Labeled d4
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1外消旋α-羥基布洛芬質(zhì)量規(guī)格:美國進口rac α-Hydroxy Ibuprofen
大鼠癌細胞;SHZ-889-芴甲基-N-琥珀酰亞基碳酸酯,英文名或英文縮寫:FMOC-OSU,級別:BR,99%,規(guī)格:10克
BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細胞裂解液 (陽性對照) α-L-巖藻糖苷酶 α-L-Fucosidase (1.8u/mg) 9037-65-4 1U 通用試劑
人膀胱基質(zhì)成纖維細胞總RNAHBdSF NA加醋-D FORMIC cCID C-D 917-71-2
ATF2 Others Human 人 ATF2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Chloroauricacidhydrated四水合錄金酸5毫克基準試劑,99.95%
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17(L-絲酸)
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。