產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4359 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
猴型逆轉錄病毒PCR檢測試劑盒供應 | Simian TypeD Retrovirus(SRV)DPCR | BKP4359 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:猴型逆轉錄病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
6-Aminouracil 873-83-6 中文名:6-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 ()測試盒 Glycosylated hemoglobin () test kit
4-Aminosalicylic acid 65-49-6 中文名:4-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3 肝/肌糖元測試盒 Liver / muscle glycogen test kit
3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 4149/6/8 中文名:3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮 分子式:C9H9N3O β-葡萄糖酸苷酶測試盒 Beta - glucose - acid - enzyme test case
2-Amino-5-nitrothiazole 121-66-4 中文名:2-氨基-5-硝基噻唑 分子式:C3H3N3O2S 紅細胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測試盒 Erythrocyte NADH high iron hemoglobin reductase test kit
1-Amino-2-methylanthraquinone 82-28-0 中文名:1-氨基-2-甲基蒽醌 分子式:C15H11NO2 碳酸氫 500g
兔粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 3543-74-6 中文名: 分子式:C18H27N3O4 度:98.0% 關鍵詞:
兔粒細胞集落刺激因子elisa試劑盒 兔粒細胞集落刺激因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔粒細胞集落刺激因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔粒細胞集落刺激因子試劑盒、兔粒細胞集落刺激因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 中文名:5-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S
兔粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 29927-08-0 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S 度:98.0% 關鍵詞:
兔可溶性細胞間黏附分子1 英文名稱: Rabbit soluble Iercellular Adhesion Molecular 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: sICAM-1 4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone 4551-69-3 中文名:4-苯甲?;?/span>-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮 分子式:C17H14N2O2
兔可溶性破骨細胞異化因子(rabbit RANKL) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 4-Androstenediol 1156-92-9 中文名:4-雄烯二醇 分子式:C19H30O2
猴型逆轉錄病毒PCR檢測試劑盒供應NCI-H358(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)富馬酸酮替芬質量規(guī)格:>99%,BRKetotifen fumarate
CL-0464USMC(大鼠平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2富馬酸酮替芬(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Ketotifen fumarate
CD44 Others Human 人 CD44 人細胞裂解液 (陽性對照) 倍他米質量規(guī)格:>98% Betamethasone
人肝內膽管上皮細胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg倍他米(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98% ,標準品Betamethasone
5637(HTB-9)細胞,人細胞 大鼠細胞(癌細胞接種到肝臟成瘤),Walker-256細胞 MLF, 小鼠成纖維細胞比阿培南質量規(guī)格:度>97%Biapenem
人真皮成纖維母細胞-HDF-a2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran
CGB5 Others Human 人 CGB5 人細胞裂解液 (陽性對照) 3',6'-二甲氧基熒烷(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)3',6'-Dimethoxyfluoran
家兔骨髓間充質干細胞;2012083MSC1,1'-亞甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC))質量規(guī)格:>97.0%(GC)1,1'-Methylenedi-2-naphthol
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr- 細胞,TE-11細胞 B82細胞,鼠細胞系2-萘基芐基(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)Benzyl 2-Naphthyl Ether
B16-F10, 小鼠色素瘤高轉移細胞 Mouse5-溴吲哚 質量規(guī)格:>99%5-Bromoindole
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。