產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4358 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
猴病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Simian Immunodeficiency Virus(SIV)RTPCR | BKP4358 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:猴病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
6-Aminonicotinic acid 中文名:6-氨基煙酸 分子式:C6H6N2O2 度:98.0% 小鼠抗小核糖核蛋白/SM抗體 英文名稱: Mouse Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide/Sm 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: sNP/SM
3-Amino-2-naphthoic acid 中文名:3-氨基-2-萘甲酸 分子式:C11H9NO2 度:98.0% 小鼠超氧化物歧化酶 英文名稱: Mouse Superoxide Dismase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SOD
(S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO 度:99.0% 小鼠素釋放素受體(GHR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Amino-N-methylbenzamide 中文名:4-氨基-N-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0% 小鼠激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-Aminoindole 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0% 小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 147086-79-1 中文名: 分子式:C8H8OS2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 147086-79-1 中文名: 分子式:C8H8OS2
兔抗糖蛋白抗體elisa試劑盒 兔抗糖蛋白抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔抗糖蛋白抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗糖蛋白抗體試劑盒、兔抗糖蛋白抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one 115473-15-9 中文名: 分子式:C7H10ClNOS 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one 中文名: 分子式:C7H10ClNOS 度:98.0%
兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Azacytidine 320-67-2 中文名:5-氮胞苷 分子式:C8H12N4O5
猴病毒PCR檢測試劑盒說明書NCI-H358(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SH-SY5Y(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)L-正亮氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Norleucine
CL-0359HLF-a(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-D-4-苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH
CD28 Others Human 人 CD28 / TP44 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,5-二-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:BR,98%3,5-Diiodo-L-tyrosine
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞總RNAHRCEpiC NAL-脯氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRL-Proline methyl ester hydrochloride
MDA-MB-468細(xì)胞,人癌細(xì)胞 猴的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,MSCS細(xì)胞 HT-29, 人細(xì)胞L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Serine methyl ester hydrochloride
人小細(xì)胞;NCI-H2227依諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Enoxacin
CD3D & CD3E Others Mouse 小鼠 CD3D & CD3E Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) [Nle4,DPhe7] a-促激素酰胺; 美拉諾坦 I質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle4,DPhe7] a-MSH, amide; Melanotan I
COC1 人細(xì)胞[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(1-34) 酰胺 (牛)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle8’18,Tyr34]-pTH (1-34) amide (bovine)
AsPC-1人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 AsPC-1 human metastatic pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% Hyclone滅活血清[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(3-34) 酰胺(牛)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle8’18,Tyr34]-pTH (3-34) amide (bovine)
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)2-氨基咪唑硫酸鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%2-Aminoimidazole hemisulfate