產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4335 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
柯拉松血吸蟲PCR檢測試劑盒供應 | Schistosoma curassoniPCR | BKP4335 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:柯拉松血吸蟲PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
5-Benzyl-1H-tetrazole 18489-25-3 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O 計數(shù)液 Alkaline phosphatase stain
Benzyl 4-hydroxybenzoate 94-18-8 中文名:4-羥基苯甲酸芐酯 分子式:C14H12O3 Acid phosphatase stain
(-)-Noe's Reagent 108031-79-4 中文名:(-)-核歐沃豪斯效應試劑 分子式:C24H38O3 定性測試盒 Acid esterase stain
2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane 2024-88-6 中文名:2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷 分子式:C17H14Cl2O4 嗜肺軍團桿菌(LP)核酸檢測試劑盒 48T
3,6-Bis(hydroxymethyl)durene 7522-62-5 中文名:3,6-雙(羥甲基)杜烯 分子式:C12H18O2 綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
兔p物質(SP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 83846-85-9 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 度:98.0%
兔p物質(SP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2
兔p53(p53)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 83846-85-9 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS
兔p53(p53)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde 231278-84-5 中文名: 分子式:C26H17ClFN3O3
兔I型膠原(rabbit Collagen I) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 4-Aza-*ndrostan-1-ene- 3-one-17carboxylic acid 140700-63-6 中文名: 分子式:C19H27NO3 度:98.0% 關鍵詞:
柯拉松血吸蟲PCR檢測試劑盒供應OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )質量規(guī)格:D,99.9%Dimethyl Sulfoxide-D6
CM-H053人細胞完全培養(yǎng)基100mL氘代DMSO-D6(10 g )質量規(guī)格:D,99.8%+TMS 0.03%Dimethyl Sulfoxide-D6
DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)質量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma分裝Proteinase K
人海馬星形膠質細胞HA-h蛋白酶K(Sigma)質量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma原裝Proteinase K
Hs 181.Tes細胞,正常人細胞 人癌細胞,HCC1937細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf胰凝乳蛋白酶抑制劑質量規(guī)格:進分Chymostatin
人脂肪微內(nèi)皮細胞HAMEC抗壞血酸;維生素C質量規(guī)格:AR;>99%Ascorbic acid;vitamin C
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素C(標準品)質量規(guī)格:含量測定Ascorbic acid;vitamin C
非洲綠猴腎細胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺質量規(guī)格:AROctadecanamine
NCI-H157細胞,人非小細胞 小鼠細胞,S-180細胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL山梨酸質量規(guī)格:AR,99%Sorbic acid
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞細胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品DL-Menthol
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。