產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4329 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
寄生水霉PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Saprolegnia parasiticaPCR | BKP4329 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:寄生水霉PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
5-Aminouracil 中文名:5-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 度:98.0% 小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Amoxicillin trihydrate 中文名:羥氨芐青霉素三水合物 分子式:C16H19N3O5S 度:98.0% 小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-Amino-4-methylbenzamide 中文名:3-氨基-4-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0% 小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid 中文名:氨噻肟酸 分子式:C6H7N3O3S 度:98.0% 小鼠促卵泡素 英文名稱: Folliopin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FSH
5-Aminoindazole 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0% 凋亡相關(guān)因子 英文名稱: apoptosis-inducing factor Fas 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Fas
土壤纖維素酶(S-CL)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 2374-03-0 中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
土壤無機(jī)0(S-PHOS)含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid 116-63-2 中文名:4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S 度:98.0%
土壤無機(jī)0(S-PHOS)含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Aminoantipyrine 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O 度:99.0%
土壤脫氫酶(SDHA)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Aminoantipyrine 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O
土壤酸性蛋白酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide 中文名:4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式:C14H16N2O4S 度:99.0%
寄生水霉PCR檢測(cè)試劑盒直銷P3HR1細(xì)胞,人EBV陽(yáng)性B瘤細(xì)胞 大鼠細(xì)胞株,DSL-6A/C1細(xì)胞 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-c cDNA阿立哌唑-d8質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Aripiprazole-d8
NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2阿立哌唑-d8 (丁基-d8)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Aripiprazole-d8 (Butyl-d8)
CoC1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE阿扎那韋-標(biāo)記d4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Atazanavir - Labeled d4
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO4'-羥基托莫西汀質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口4'-Hydroxy Atomoxetine
PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / PTPT 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 脫氯阿托伐醌質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Deschloro Atovaquone
PRLR Others Human 人 PRLR / Prolactin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,4-二羥基本酸100毫克
人內(nèi)根殼細(xì)胞總RNAHHIRSC NA對(duì)基-α-D-吡... 4-Nitrophenyl α-D-galactopyranoside 7493-95-0 100MG 通用試劑
VEGFA Others Rat 大鼠 VEGF164 / VEGFA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1 JP-TS cVIcTION FUqL 6474-47-8
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-偶氮脒類引發(fā)劑V401克2~8℃
NCI-H460[H460]細(xì)胞,大細(xì)胞細(xì)胞 人,H4細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/322,4-二硝基扶本(劇毒)(陰涼)2,4-fluorobenzene