產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4290 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鴨疫里默氏桿菌PCR檢測試劑盒說明書 | Riemerella anatipestiferPCR | BKP4290 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
4-Acetamidophenol 103-90-2 中文名:對乙酰氨基酚 分子式:C8H9NO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide 119018-29-0 中文名: 分子式:C16H21N3O4S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester 155405-80-4 中文名: 分子式:C16H16N4O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di 106261-49-8 中文名:甲磺酸伊馬替尼 分子式:C13H20Cl2N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 瓜酸 ELISA. 96T/48T
4,9-Dihydroxy-α-lapachone 56473-67-7 中文名: 分子式:C15H14O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 梓; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人組織蛋白去乙酰化酶elisa試劑盒 人組織蛋白去乙?;冈噭┖?/span> 規(guī)格型號:96T/48T 人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白去乙?;冈噭┖?、人組織蛋白去乙酰化酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 24352-51-0 中文名: 分子式:C28H42 度:% 關(guān)鍵詞: 麥角甾烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
人組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3,5-Di-O-caffeoylquinic acid 2450-53-5 中文名:異綠原酸A 分子式:C25H24O12
人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒 人組織蛋白酶抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人組織蛋白酶抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白酶抗體試劑盒、人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 24352-51-0 中文名: 分子式:C28H42
人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 中文名: 分子式:C28H42 度:%
人組織蛋白酶S(cath-S)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 中文名: 分子式:C28H42
鴨疫里默氏桿菌PCR檢測試劑盒說明書R 1610(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HL-60(原髓細(xì)胞)四溴熒光素鉀鹽(>85.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(HPLC)Tetrabromofluorescein Potassium Salt
CL-0196RKO(人腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2溶劑紅 48(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein
TMEM25 Others Human 人 TMEM25 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,4,5,6-四氯熒光素質(zhì)量規(guī)格:熒光染料3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein
人腦膜細(xì)胞cDNAHMC cDNA赤蘚紅B(>95.0%(E))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(E)Erythrosine B
BT-474細(xì)胞,人導(dǎo)管瘤細(xì)胞 轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞,104C1細(xì)胞 組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml4'-羥基苯偶氮基-4-羧酸水合物(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid Hydrate
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2羧甲淀粉鈉shēng huà shì jì容量:5克
CLEC6A Others Human 人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酸激酶 Pyruvate Kinase from rabbit muscle 9001-59-6 1KU 通用試劑
C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells衣康醋;亞基琥珀醋;2-亞基丁二醋;分解屋頭醋 Itcconic ccid;Propylqnqdiccrboxylic ccid 97-62-4
HSC1細(xì)胞,人色素瘤細(xì)胞 羅伊氏乳桿菌 人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)3,5-二甲基-3-5克
WPMY-1(人正?;|(zhì)永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21121-60-42-;-2-; 2-; 2-醛基2-Pyridinecarboxaldehyde;Pyridine-2-aldehyde; Picolinaldehyde; 2-Pyridyla dehyde; 2-Pyridinecarbaldehyde;
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:鴨疫里默氏桿菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。