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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Nandrolone decanoate  360-70-3  中文名：癸酸諾龍  分子式：C28H44O3 

小鼠孤兒受體配體   英文名稱：   Mouse Aemin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   A  Decoquinate  中文名：癸氧喹酯  分子式：C24H35NO5  度：98.0%

小鼠鉤端螺旋體IgGelisa試劑盒   小鼠鉤端螺旋體IgG試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠鉤端螺旋體IgG試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠鉤端螺旋體IgG試劑盒、小鼠鉤端螺旋體IgGeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Decanedioic acid  中文名：  分子式：C10H18O4  度：%

小鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISAKit   ELISA.   96T  Gatifloxacin Mesylate  316819-28-0  中文名：甲磺酸加替沙星  分子式：C20H26FN3O7S  度：98.0%   

小鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Daucosterol  中文名：胡蘿卜苷  分子式：C35H60O6
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E 紅白細(xì)胞細(xì)胞，HEL299細(xì)胞 PT67細(xì)胞，鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞籠形D-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽Caged D-erythro-Sphingosine-1-phosphate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

JEC, 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 HumanL-丙氨酰胺鹽酸鹽L-Alanamine 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

LRP1 Others Human  LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-組氨酸鹽酸鹽L-Histidine monohydrate mono質(zhì)量規(guī)格：>99%,一水

前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基PADML-高精氨酸鹽酸鹽L-Homoarginine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EVI2A Others Human  EVI2A 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) TPCK(進(jìn)分)TPCK質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分,Sigma T4376
LLC-RFP-puro小鼠Lewis細(xì)胞 LLC-RFP-puro mice with Lewis lung cancer cells DMEM+10%Hyclone 滅活血清+2ug/ml puromycin香草酸Vanillic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%

TNFSF4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)香蒲新苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Typhaneoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

心室成纖維細(xì)胞 (HCFav)( 5×105 ) 293A，胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級(jí)別) Human香葉木素-7-O-葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠細(xì)胞;BC3H1香紫蘇醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Sclareol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(HM) ( 5×105 )小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Berberine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
6-Aminoindazole  6967-12-0  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%      小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S  度：98.0%      小鼠抗血小板抗體IgG   英文名稱：   Mouse Aiplatelet aibody   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   APAb

6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone  28657-75-2  中文名：6'-氨基-3',4'-(亞甲基二氧代)苯乙酮  分子式：C9H9NO3  度：98.0%      小鼠載脂蛋白AI   英文名稱：   Mouse Apolipoprotein AI   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   Apo-AI

6-Amino-1-methyluracil  2434-53-9  中文名：  分子式：C5H7N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠載脂蛋白B   英文名稱：   Mouse Apolipoprotein B   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   Apo-B

單純病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  6972-78-7  中文名：  分子式：C5H6N4O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠載脂蛋白E   英文名稱：   Mouse Apolipoprotein E   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ApoE