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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

突觸核蛋白   英文名稱：   Human α Synucleinα   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   α-SYN  4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  52298-44-9  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

頭孢芐   1g  Amprolium   中文名：鹽酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4  度：98.0%

銅蘭蛋白（CP）檢測   Glamate detection                 β-Anhydrouzarigenin  3080-20-4  中文名：  分子式：C23H32O3 

銅－ATP酶（Cu-ATPase）測定試劑盒（比色法）                    Repaglinide ethyl ester  147770-06-7  中文名：  分子式：C29H40N2O4 

銅（Cu）測定試劑盒（絡(luò)合比色法）  Xanthopurpurin  518-83-2  中文名：1,3-二羥基蒽醌  分子式：C14H8O4  度：97.0%  關(guān)鍵詞：
Hut-102細(xì)胞，T瘤細(xì)胞系 Walker氏癌256瘤株,W256細(xì)胞 小氣道上皮細(xì)胞裂解物HSAEpiCL迷迭香酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Rosmarinic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

NCI-H226(肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2綿馬貫眾素ABBA(標(biāo)準(zhǔn)品)Dryocrassin ABBA質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Caov-3(乳突狀卵巢腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0070CRFK(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠滑膜瘤株;ZM7552’-脫氧鳥苷;2'-dG2'-Deoxyguanosine monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

狗間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪DMSC-ad2‘-脫氧胞苷2'-Deoxycytidine;2'-dC質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

DUSP3 Others Human  DUSP3 / VHR 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2‘-脫氧胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)2'-Deoxycytidine;2'-dC質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
C6大鼠細(xì)胞 C6 rat glioma cell DMEM+10% FBS普樂沙福,CXCR抑制劑Plerixafor,AMD3100質(zhì)量規(guī)格：>99%,CXCR4趨化因子受體拮抗劑

NOV Protein Human 重組 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽)A-779(D-Ala7)-Angiotensin I/II (1-7);A779質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

Hela 299(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2苯甲酮(>99.0%(GC))Benzophenone質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC),進(jìn)分

軟骨細(xì)胞生長添加物CGS二苯甲酮(標(biāo)準(zhǔn)品))Benzophenone質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

合胞病毒PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸哌侖西平Pirenzepine di質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
Withaperuvin C  中文名：  分子式：C28H38O7  度：96.5%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MMP-1

Otophylloside O  中文名：  分子式：C56H84O20  度：96.5%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MMP-2

Qingyangshengenin 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H84O20  度：92.0%  兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Otophylloside F  中文名：青陽參苷F  分子式：C48H76O16  度：95.0%  兔(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19  度：98.0%  兔補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T