產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE039 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞SK-MES-1/DDP現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: SK-MES-1/DDP現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:人肺鱗癌細(xì)胞鉑耐藥株
種屬:Human
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:CE039
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
無水錄化亞錫,英文名或英文縮寫:Tin(II) chloride anxy7nous,級別:高純,99%,帶2水,規(guī)格:1克 兔A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
534-8-41,3-二錄(劇毒)1,3-Dichloroeetone Human thrombopoietin (TPO) ELISA Kit 人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒
Acrylylchloride錄化酸25克BR,98% HumanVaricellazostervirusIgG,VZV-IgGELISAKit 人病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
2-基;虧哪啶;鄰基;α-基;2-基氮雜 2-Mqthylinoneolinq;inonecldinq;α-Mqthylinoneolinq;Chincldinq humangasiccarcinomaMarkerELISA試劑盒人標(biāo)志物ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-MU4-甲基傘形酮100克試劑級,92% 組織半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測試劑盒20次
葡聚糖凝膠G-15shēng huà shì jì容量:5KU Humanmyelinprotein2,p2ELISA試劑盒人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
75881-23-1阿利新藍(lán)8GXALCIAN BLUE 8GX 組織脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
乳糖酸5克RT HumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit人胃標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
聚乳酸 Polylactic acid,Mw ~60,000 26100-51-6 1G 通用試劑 人細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白(MEPE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
氮同 Lcuroccprcm 297-89-3 豬活性氧(ROS)免疫試劑盒 Pig Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
焦嶙酸四鈉十水物,英文名或英文縮寫:TSPP decahydrate,級別:高純,98%,規(guī)格:1克 大鼠芳烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白1(ARL)免疫試劑盒 Rat Aryl hydrocarbon receptor nuclear anslocator-like protein 1,ARL ELISA kit
3090-36-6tributyl(lauroyloxy)stannane CLIAKitforUGT2B4(Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4)ELISAKit人二尿核苷葡糖酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4規(guī)格:48T/96T
DIOP鄰本二酸二辛酯100克CP,94% 尿液維生素E高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
dl-alpha-基色安 3-(2-cMINOPROPYL)INDOLq 1999/6/3 ELISAKitsTNF-R2人可溶性受體2規(guī)格:48T/96T
DAOS 小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 ,英文名: Col Ⅲ ELISA Kit
SK-MES-1/DDP現(xiàn)貨供應(yīng)低聚半乳糖,英文名或英文縮寫:Galacto-Oligosaccharides,級別:高純,98%,規(guī)格:500克 小鼠環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒 Mouse cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
443-80-1DL-異白酸2-AMINO-3-[metxYLTHIO]BUTYRIC ACID 樣因子3(INSL3)ELISA試劑盒 ,英文名: INSL3 ELISA Kit
D-ArginineD-2-基-5-胍基戊酸1克BR,99% Mouseai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,3-二[三(羌基)安基]炳烷 (Bis-Tris Propane) 1,3-Bis[tris(xy7noxymqthyl)mqthylcmino]propcnq 64431-96-2 ELISAKitC3a小鼠補(bǔ)體片斷3a規(guī)格:48T/96T
三拂醋工 Mqrcuric trifluoroccqtctq 1327-21-7 guineapigIerleukin6,IL-6ELISAKit豚鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。