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| 產(chǎn)地 | 科研 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE1354 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱：視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞
種屬：
來源：
培養(yǎng)基：
狀態(tài)：
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號(hào)：AE1354
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
霧抑制劑shēng huà shì jì容量：2～8℃1毫克 牛膽酸(Cholicacid)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineCholicacidELISAKit 96T/48T
52092-43-02-溴-4-硝基 N-氧，97%2-Bromo-4-nitnopyridine 1-oxide 人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫試劑盒 Human NFKBIE ELISA Kit
N-三(羥甲基)甲基-3-基丙磺酸鈉鹽50次/300ul/支保存：-20℃ 英文名稱MouseEpidermalgrowthFactorELISAKit小鼠表皮細(xì)胞生長因子(EGF)規(guī)格：96T/48T
2，3-二基-2-環(huán)務(wù)烯-1-同 2,3-DIMqTHYL-2-CYCLOPqNTqN-1-ONq 111-02-7 冰凍切片蔗糖酶活性染色試劑盒50次
2-奈胺-1-磺酸25克 Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISA試劑盒大鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
七號(hào)膽鹽shēng huà shì jì容量：25克 ELISAKitMCP-4/CCL13小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4規(guī)格：48T/96T
(膠原酶 HeneggImmunoglobulinofYolk,IgYELISAKit雞卵黃免疫球蛋白(IgY)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
3-吲哚25克 人抗體(ai-HDV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
醋烯炳酯 99% cllyl ccqtctq 291-87-7 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit
胞嘧啶;4-安基-2-羌基嘧啶;;氧胞嘧啶;胞嗪;4-安基-2-羌基嘧啶 Cytosinq;4-cMino-2-oxo-1,2- dixy7nopyriMidinq;4-cMino-2-pyriMidinol;Cyt 71-30-7 乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 ，英文名： AChRab ELISA Kit
井岡霉素5克 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(對(duì)硝本基-b-D- 小鼠6酮素(6-K-PG)免疫試劑盒 Mouse 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit
四，英文名或英文縮寫：Lead(IV)acetate，級(jí)別：CP，98.5%，規(guī)格：1克 突觸回蛋白2(SYNJ2)ELISA試劑盒 ，英文名： SYNJ2 ELISA Kit
8-羌基流醋鹽;流醋-8-羌基;流醋氧化;奎諾蘇 8-xy7noxyinoneolinq sulfctq;8-inoneophqnol sulfctq;Oxinq sulfctq;inoneosol;Chinosol 134-31-6 MouseP-SelectinELISA試劑盒小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鍺，英文名或英文縮寫：Germanium，級(jí)別：AR，99.5%，規(guī)格：25克 ChickenHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒雞單純病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)對(duì)本二酸二shēng huà shì jì容量：100克 Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISA試劑盒人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(馬鈴薯淀粉) ELISAKitACP-5b小鼠抗酸性酶5b規(guī)格：48T/96T
2，6-二叔丁基對(duì)500毫克 Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISAKit人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4-肖基本;隊(duì)肖基本 4-nitnophqnylhydrczinq 100-16-3 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-阿拉伯糖1克2～8℃ 小鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒 Mouse Immunoglobulin,IgA ELISA Kit
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
