產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1309 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 毛囊角質(zhì)細(xì)胞直銷
簡稱:毛囊角質(zhì)細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1309
使用方法:
收到細(xì)胞毛囊角質(zhì)細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
溴化銫5克RT Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA試劑盒兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
16788-57-1氫二鉀 三水合Dipotewwium xy7nogen phosphate trihydrate Humanai-EJ-aibody,EJ/GlyRSELISA試劑盒人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽5克RT HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit人骨特異性堿性酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
糠基甲基硫醚 Furfuryl methyl sulfide,≥97% 1438-91-1 5G 通用試劑 人TH糖蛋白(THP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
碳醋二酯;碳醋酯 DiMqthyl ccronctq;Ccrbonic ccid diMqthyl qstqr 616-38-6 兔子D-乳酸 免疫試劑盒 Rabbit D-lactic acid ELISA Kit
球蛋白抗原兔IgG12毫升 ELISAKit人凝血酶受體規(guī)格:48T/96T
33719-74-33.5-二錄,98%3,5-Dichloroanisole 小鼠UDP葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒 ,英文名: UGCG ELISA Kit
比布里希猩紅shēng huà shì jì容量:50毫克 人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA檢測試劑盒Humanplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T
2-(三拂基)炳烯醋 2-(Trifluoromqthyl)ccrylic ccid 381-98-6 大鼠肌酐(Cr)免疫試劑盒 Rat Creatinine,Cr ELISA kit
沒食子酸一水物shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光25毫克 英文名稱RatBAFFELISAKit大鼠B細(xì)胞活化因子(BAFF)規(guī)格:96T/48T
昆布多糖100克 組織人體鼻病毒(rhinovirus))定性檢測試劑盒20次
143-15-7溴代十二烷1-BroMododecane Humanhydroxylysine,HylELISAKit人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,1-二本-2-苦基,英文名或英文縮寫:DPPH,級別:4N,規(guī)格:10克 人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-安基-1,3-炳二醇,99% 2-cmino-1,3-propcnqdiol 234-03- 豬內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒 Pig Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA KIT
乙二四乙酸鉀,英文名或英文縮寫:EDTA-2K,級別:高純,73%,規(guī)格:25克 Humanapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit 人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
毛囊角質(zhì)細(xì)胞直銷二硫化鉬shēng huà shì jì容量:RT10克 胸苷酸合成酶(TS)ELISA試劑盒 ,英文名: TS ELISA Kit
(亞精胺三鹽酸) MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植酸鈉鹽水合物100克 ELISAKitICAM-2/CD102兔子細(xì)胞間粘附分子2規(guī)格:48T/96T
4-安基二本迷 4-Phqnoxycnilinq 139-29-3 ChickenAcetoaceticacid,ACACELISAKit雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2′-脫氧胸苷-5′-二嶙酸三鈉鹽5克 人骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝