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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 外根鞘細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱(chēng)：外根鞘細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1308
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞外根鞘細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀(guān)察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
溴化四庚，英文名或英文縮寫(xiě)：Tetraheptylammonium bromide，級(jí)別：4N，99.8%，規(guī)格：1克  生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒 ，英文名： GROγ/CXCL3/MGSA ELISA Kit

6020-87-7肌酸Creatine monohydrate  PorcineC-reactiveprotein,CRPELISA試劑盒豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

偶氮二異丙基咪唑啉鹽酸鹽，英文名或英文縮寫(xiě)：AIBI，級(jí)別：AR，規(guī)格：500毫克  human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1,HMGCS1ELISA試劑盒人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

赤芝酸E Lucidenic acid E (HPLC,≥98%) 98665-17-9 5MG 通用試劑  Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAbELISAKit人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Dowex 50WX8 離子交換樹(shù)脂 DOWqX(R) 50 WX8 11119-67-8  人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
球蛋白抗原兔IgGshēng huà shì jì容量：12毫升  咖啡環(huán)氨酸(cyclamate)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次

951-78-02’-脫氧尿苷2'-Deoxyuridine  ELISAKitSRB/CD36人清道夫受體B規(guī)格：48T/96T

15-150kDa精確分子量MARK5克  小鼠白介素13(IL-13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2，6-二氧基 2,6-Dimqthoxyncphclqnq 2486-22-2  Rat nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒

吲哚美辛1克RT，避光  HumanCrosslaps,CrELISAKit 人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
辣根酶標(biāo)記山羊抗大鼠IgG800條/箱  Mouseai-thrombieceptor,AELISA試劑盒小鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2226-88-2丁二酸銨AMMONIUM SUCCINATE  ELISAKitALT小鼠氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶規(guī)格：48T/96T

腸激酶shēng huà shì jì容量：100克  guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

莫能菌酸鈉 Monensin sodium salt 22373-78-0 25G 通用試劑  人軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

隊(duì)本二酚;輕醌;1,4-二羌基本;幾奴泥;海得 xy7noinoneonq;p-Bqnzqnqdiol;p-Dixy7noxybqnzqnq;xy7noinoneol;inoneol 13-31-9  小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(sm Actinin-α)免疫試劑盒 Mouse skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit
外根鞘細(xì)胞特價(jià)二硫化碳shēng huà shì jì容量：5克  小鼠17-β-羥基類(lèi)固醇脫氫酶10(HSD17β10)ELISA試劑盒 ，英文名： HSD17β10 ELISA Kit

5108-96-3二硫代銨鹽Ammonium 1-pyrrolidinedithiocarbamate  人抑制素A(INH-A)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanInhibin,INH-AELISAKit 96T/48T

植酸鈉25克  大鼠(LDL)免疫試劑盒 Rat low density lipoprotein,LDL ELISA Kit

DL-苯甘醇 DL-Phenylglycinol,99% 7568-92-5 1G 通用試劑  CLIAKitforypsinELISAKit大鼠胰蛋白酶規(guī)格：48T/96T

異務(wù)二烯, 99% Isoprqnq 78-79-2  胚胎干細(xì)胞造血細(xì)胞(hematopoitic)定向分化試劑盒5次
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。