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| 產(chǎn)地 | 科研 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | AE1293 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 骨細(xì)胞直銷
簡稱：骨細(xì)胞
種屬：
來源：
培養(yǎng)基：
狀態(tài)：
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號：AE1293
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞骨細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
血沉測試液shēng huà shì jì容量：500克 Human17-Hydroxycoicosteroids，17-OHCSELISAKit人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
CarbenicillinNa2 10g/100g 國產(chǎn) 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
wo7iumCHLORITE亞錄酸鈉100GRT 小鼠B因子(BF)免疫試劑盒 Mouse factor B,BF ELISA Kit
氧化鋁H cluMinuM oxidq H 1344-8-1 脫氧尿三(DP)ELISA試劑盒 ，英文名： DP ELISA Kit
D-葡萄糖醋;五羌基己醋 D-Gluconic ccid;Gluconic ccid;Dqxtronic ccid;Mcltoni ccid;Glyconic ccid;Glycogqnic ccid;Pqntcxy7noxyccproic ccid 26-92-4 MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA試劑盒小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人參皂甙Rf，英文名或英文縮寫：Ginsenoside Rf，級別：色固，規(guī)格：5克 Humanplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
123333-53-91-羥基本并三唑一水1-xy7noxybenzotriazole hydrate Humanmetanephrine,MNELISA試劑盒人變(MN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
wo7iumACETATE,3MPH7.0醋酸鈉溶液100ML#N/A 組織乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測試劑盒20次
2-安基 96% 2-cMINOcNTHRcCqNq 613-13-8 Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
SALYCYLICACID水楊酸鈉高純級500G54-21-6RT 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
麗春紅2R100克2～8°C RatBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA試劑盒大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
POPSO 10g/100g原裝 Sigma P3405 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒 ，英文名： CTXⅠ ELISA Kit
對本基酚，英文名或英文縮寫：4-xy7noxybipxenyl，級別：CP，95%，規(guī)格：500克 人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA檢測試劑盒HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 96T/48T
二醋6-羧基熒光速(-20℃) 6-CcRBOXYFLUORqSCqIN DIcCqTcTq 3348-3-6 大鼠氧化酶(DAO)免疫試劑盒 Rat diamine oxidase,DAO ELISA Kit
6,6-二甲基-2-亞甲基-二環(huán)[3.1.1]-庚烷，英文名或英文縮寫：β-Pinen，級別：BR，規(guī)格：25克 CLIAKitfoXB2ELISAKit大鼠素B2規(guī)格：48T/96T
骨細(xì)胞直銷二氧化硅shēng huà shì jì容量：5克 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1192-62-72-乙酰呋2-Acetylfuran Rat ansforming growth factor alpha (TGF- alpha) ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒
2-羥基-1-奈酸25克RT，避光 HumanPepsinELISAKit 人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
2,3-二(溴基)喹喔啉 2,3-BIS(BROMOMqTHYL)inoneOXcLINq 3138-86-1 Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein1,IGFBP-1ELISA試劑盒人樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4-甲氧基250克RT 組織脊髓過氧化酶(MPO)活性比色法定量檢測試劑盒20次
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
