|
| 產(chǎn)地 | 科研 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | AE1277 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 精原細(xì)胞直銷
簡稱：精原細(xì)胞
種屬：
來源：
培養(yǎng)基：
狀態(tài)：
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號：AE1277
使用方法：
收到細(xì)胞精原細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
亞硝基-R-鹽，英文名或英文縮寫：nitnoso R salt，級別：BS，規(guī)格：25克 人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
30%(*);二氧化氫;二氧化二氫xy7nogen Peroxide Concentrate 豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
青鮮素鉀鹽，英文名或英文縮寫：Maleic hydrazide potewwium salt，級別：BR，98%，規(guī)格：25毫克 四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 ，英文名： BH4 ELISA Kit
抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,≥98% 9087-70-1 1MG 通用試劑 Mouseβmannosidase,βManaseELISA試劑盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
固暗藍(lán)R鹽;堅牢深藍(lán)R鹽;4-安基-2,5-二氧基-4′-肖基偶氮二錄本重氮鹽 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4′-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195; GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒山羊α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
乳酸過氧化物酶shēng huà shì jì容量：1克*5 兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Polypeptone 250g/1kg 國產(chǎn) Rat platelet glycoprotein B III (b III a/CD41+CD6 a GP- II 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD6
磺胺100克 HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinD,SP-DELISAKit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
6-羌基多巴安輕溴醋鹽 95% 6-xy7noXYDOPcMINq xy7noBROMIDq 636-00-0 HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISA試劑盒人纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
A.C.E.BUFFER1X,TINTEDA.C.E. 測序緩沖液 (1X 帶顏色)測序級1LRT 組織β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性熒光定量檢測試劑盒20次
亮酸基肽酶1克2～8℃，避光 異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HPQ/NSAP1)ELISA試劑盒 ，英文名： SYNCRIP/HPQ/NSAP1 ELISA Kit
Piperacillin 1g原裝 INALCO1758-9170 Mousealkalinephosphatase,ALPELISA試劑盒小鼠堿性酶(ALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
丁基羥基，英文名或英文縮寫：BHA，級別：CP，99%，規(guī)格：1克 ELISAKiesistin小鼠抵抗素規(guī)格：48T/96T
芴同 9-Fluorqnonq 486-2-9 Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
電解，英文名或英文縮寫：Lead，級別：AR，99%，規(guī)格：25克 人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
精原細(xì)胞直銷放現(xiàn)菌肉湯培養(yǎng)基支RT 犬轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒 Dog ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
(魚精DNA) 英文名稱MouseCCL1ELISAKit小鼠CCL1規(guī)格：96T/48T
低熔點(diǎn)瓊脂糖shēng huà shì jì容量：2～8℃1克 冰凍切片組織細(xì)胞色素C氧化酶表達(dá)免疫熒光檢測試劑盒10/20次
軟骨速酶 (-20℃) CHONDROITINcSq cBC 904-13-9 ratEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
DL-蘋果酸 DL-Malic acid (≥98%) 6915-15-7 25G 通用試劑 小鼠CD5抗原樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒 ，英文名： CD5L ELISA Kit
