產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1227 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 微內(nèi)皮細胞價格
簡稱:微內(nèi)皮細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1227
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞微內(nèi)皮細胞價格后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
氧化金500毫升RT 小鼠脂氧素A4(LXA4)免疫試劑盒 Mouse Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit
71-23-81-1-Propanol; Propanol; Alcohol C3; 豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒 48T
乳酸測試盒(測全血)shēng huà shì jì容量:RT50支/包 HumanPlasmafibronectin,pFNELISA試劑盒人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十六烷基基化銨 Hexadecyltrimethylammonium chloride,≥... 112-02-7 1G 通用試劑 ELISAKitPⅠCP豬Ⅰ型前膠原羧基端肽規(guī)格:48T/96T
半乳糖二醋異美汀 IsoMqthqptqnq Mucctq 749-31-1 Humancysteinylleukoienes,CysLTsELISAKit人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十八烯酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium oleate,級別:超純,99%,規(guī)格:5克 Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
AmikacinSulfate 5g原裝 INALCO1758-9312 小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-pxenylpropanolγ-本5克CP,98% Rat glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒
鎳觸媒 Convqrsion cctclyst Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 人17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
PZ硫氮雜5克AR,95% HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISA試劑盒人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫化鈉shēng huà shì jì容量:25克 豬促生長激素釋放激素(GHRH)免疫試劑盒 Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
1990-5-1愈創(chuàng)木酚;鄰羥基本Guaiacol;o-xy7noxyanisole;1-xy7noxy-2-metxoxybenzene HumanFibronectin,FNELISAKit 人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
3,3,-二基聯(lián)本胺100克2~8℃ HumanN-terminalextein,Ext-NELISA試劑盒人N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,4-二基本安 2,4-Dimqthyl cnilinq 92-68-1 ELISAKitOxLDL豬氧化規(guī)格:48T/96T
酰胺&甲叉雙酰胺溶液1KU2~8℃ HumanEukaryoticanslationinitiationfactor3a,eIF3aELISAKit人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
微內(nèi)皮細胞價格甘酸鈣100克 RatCaspase-9,Casp-9ELISA試劑盒大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Aprotinin 6ku/25ku Usbio分裝 小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
甘油三油酸醋,英文名或英文縮寫:Glycerol trioleate,級別:BR,97%,規(guī)格:5克 Rat cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒
流醋本安 cnilinq sulfctq 24-16-2 Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 人6酮素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制劑 VII試劑級米白色固體COLDsigma HumanC-PeptideELISA試劑盒人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。