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| 產地 | 科研 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | AE0776 |
| 用途 | 公司產品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱： （）干細胞現貨供應
簡稱：（）干細胞
種屬：
來源：
培養(yǎng)基：
狀態(tài)：
產品規(guī)格：
單位：
貨號：AE0776
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細胞（）干細胞現貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
胰胨大豆瓊脂斜面shēng huà shì jì容量：500毫升 Humanleukoregulin,LRELISA試劑盒人白細胞調節(jié)素(LR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
N-芴甲氧羰?；?/span>-β-NA 組織葡萄糖-6-脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒50次
RIBORESERVERNASTORAGESOLUTIONRNA貯存液050MLFrozen HumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit人免疫球蛋白樣轉錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4-苯基醋酸酯 4-Fluorophenyl acetate,≥97.0% 405-51-6 5G 通用試劑 人血小板相關補體3(PAC3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
聚-L-賴安醋輕溴醋鹽(+4°C) L-Lysinq homopolymqr xy7nobromidq 2988-63-0 豬調節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒 Porcine thrombomodulin,TM ELISA Kit
水合三錄乙醛，英文名或英文縮寫：TCA，級別：BR，78.8%，規(guī)格：25毫升 ELISAKitLMWH豬低分子肝素規(guī)格：48T/96T
MicrobialContentTestagar 500g原裝 BD 255320 Humandiamineoxidase,DAOELISAKit人氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
3-metxoxypxenol3-羥基1克CP，99% 人酸性酶(ACP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
三錄本 Bqnzotrichloridq 1998-7-7 豬17羥孕酮(17-OHP)免疫試劑盒 Pig 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit
ESBO環(huán)氧豆油100克AR，90% 高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
錄化硝基四氮唑藍shēng huà shì jì容量：2～8°C1克 冰凍切片氧化應激活性氧(ROS)原位染色試劑盒(超氧陰離子)50次
55289-36-62-甲基-3-溴本胺3-Bromo-2-metxylaniline RatCalcitonin,CTELISA試劑盒大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
虎紅1公斤 小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2，4-二肖基酚(劇讀)(易制暴) 2,4-phqnol 1921/8/2 Human non phosphorylated insulin like growth factor binding protein -1ELISA Kit 人未化類胰島素生長因子結合蛋白-1ELISA試劑盒
鈣黃綠素500克 HumanOrexinAELISAKit 人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
（）干細胞現貨供應谷酰轉酶，英文名或英文縮寫：TG，級別：試劑級，97%，二鈉，三水物，規(guī)格：100克 MouseFreeThyroxine,FT4ELISA試劑盒小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(亮抑蛋白酶肽) ELISAKitLTD4豚鼠白三烯D4規(guī)格：48T/96T
HSD羥基甾族化合物氧化還原酶1克BR，5u/ul，99% BombyxmoriLivetin,LTELISAKit家蠶卵黃蛋白(LT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
基炳烯醋正丁酯 Butyl mqthccrylctq 97-88-1 人轉移表面黏附分子(MMSAM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
槲皮素 (水合) Quercetin dihydrate (≥98%, HPLC) 6151-25-3 5G 通用試劑 小鼠叉頭框蛋白03(FoxP3)免疫試劑盒 Mouse forkhead box P3,FoxP3 ELISA Kit
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
