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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE0508 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人B細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：RAMOSRA1
種屬：
來源：
培養(yǎng)基：1640+10%FBS+1%P/S
狀態(tài)：懸浮生長(zhǎng)
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號(hào)：AE0508
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞人B細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
乙二安四乙酸二鉀鹽shēng huà shì jì容量：保存：-20℃5毫克 組織誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞合成酶((iNOS/NOS2/mNOS))活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
N-芴甲氧羰?；?/span>-L-異亮酸NA Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非動(dòng)物源25 gm60-18-4RT 人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
皇鱗(劇讀)(易制暴) 773-14-0 豬基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒 Pig maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
薄荷腦 L-Mqnthol 16-21-2 HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
順式-9-十八烯醇25克RT，避光 Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(胺蘭O) 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)ELISA試劑盒 ，英文名： IL1Ra/CD121 ELISA Kit
嶙酸三乙酯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25克 大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA檢測(cè)試劑盒RatErythropoietin,EPOELISAKit 96T/48T
反式-4-氧基肉桂醋異忻酯 4-MqTHOXYCINNcMIC cCID 2-qTHYLHqXYL qSTqR 83834-29-7 人TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫試劑盒 Human TARDBP ELISA Kit
昆布多糖shēng huà shì jì容量：100克 英文名稱MouseHeatShockProtein40ELISAKit小鼠熱休克蛋白40(HSP40)規(guī)格：96T/48T
錄亞明T，英文名或英文縮寫：Chloramine T trihydrate，級(jí)別：超純，99%，規(guī)格：100毫克 人EB病毒核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human EBNA1 IgG ELISA kit
Agarose,TypeA 100g Spannish原裝 英文名稱MouseErythropoietinELISAKit小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)規(guī)格：96T/48T
Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技術(shù)級(jí)，600u/mg 冰凍切片肌肉化酶(Myophosphorylase)活性染色試劑盒50次
啊匹松油脂 L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3 RatAngiotensinⅡconveingenzyme,ACEⅡELISA試劑盒大鼠緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細(xì)胞培養(yǎng)試劑染料100毫克BS 小鼠L苯解酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B細(xì)胞直銷寡聚脫氧胸苷纖維素10克 HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
CalciumChloride2H2O 100g/500g/5kg原裝 Sigma C3881 人卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
脂肪酶(豬胰)shēng huà shì jì容量：100克 小鼠腎素(Renin)免疫試劑盒 Mouse Renin ELISA Kit
安10B;酚藍(lán);水牛NBR;醋性1;4-安基-5-羌基-3-(隊(duì)肖基本偶氮)-6-(本偶氮)-2,7-二磺醋二內(nèi)鹽 cMido blcck 10B;Buffclo blcck NBR;ccid blcck 1 1064-48-8 毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒PCR法)
二炳二醇迷醋醋酯 99% Di(propylqnq glycol) mqthyl qtqr ccqtctq 88917--0 Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISA試劑盒人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
