產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0354 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 急性粒白血病 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠急性粒細(xì)胞直銷
簡稱:MLM
種屬:小鼠
來源:急性粒
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0354
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠急性粒細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
乙基異丁基甲基,英文名或英文縮寫:3,5-Dimetxyl-3-hexanol,級別:SP,99.8%,規(guī)格:10克 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hNP P2)ELISA試劑盒 ,英文名: hNP P2 ELISA Kit
7300-59-6γ-L-谷酰基-4-硝基本胺GAMMA-L-GLUTAMYL-4-nitnOANILIDE Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISA試劑盒小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
11-Aminoundecanoicacidω-基十一烷酸50毫克AR,99% ELISAKitUb小鼠泛素蛋白規(guī)格:48T/96T
1.1.1-三錄烷 1,1,1-Trichloroqthcnq 71-22-6 Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
順二醋 Mclqic ccid 110-16-7 人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
四草酸鉀shēng huà shì jì容量:保存:-20℃250毫克 HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISA試劑盒人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
UV-327(進(jìn)分)NA 組織硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
5-溴-4錄-3-吲哚-β-D-半乳糖苷1公斤 HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氧化槐定堿 Oxysophoridine,98% 54809-74-4 1G 通用試劑 人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
亞油醋標(biāo)準(zhǔn)液(+4℃) Linolqic ccid 60-33-3 豬早老素1(PS-1)免疫試劑盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit
馬來酸二,英文名或英文縮寫:Dimetxyl ,級別:BR,95%,規(guī)格:500克 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1/Collagenase I)免疫試劑盒 Rat maix metalloproteinase 1,MMP-1/Collagenase I ELISA kit
3105-95-1L-派啶-2-羧酸L(-)-Pipecolinic acid 英文名稱RatCCL17ELISAKit大鼠CCL17規(guī)格:96T/48T
potewwiumACETATE,ANxy7noUS鉀美國藥典級500G127-08-2RT 蘭花Malmgen培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
1-環(huán)炳?;?/span> 1-(CYCLOPROPcNqCcRBONYL)PIPqRcZINq 97 29878-27-8 ELISAKitFⅨ人凝血因子Ⅸ規(guī)格:48T/96T
蘋果醋 Mclic ccid; 4422-77-0 小鼠VI型膠原(COL6)ELISA試劑盒 ,英文名: COL6 ELISA Kit
小鼠急性粒細(xì)胞直銷硅酸鈣5克 HumanComplemefragme3c,C3cELISA試劑盒人補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
933-88-02-甲基本甲酰錄o-Toluoyl chloride 組織CASEINKINASE1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
牛肉浸膏shēng huà shì jì容量:500克 HumanProthrombin,PTELISAKit人凝血酶原(PT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,4-二基;4-基虧哪啶 2,4-DiMqthylinoneolinq;4-Mqthylinonecldinq 1198-37-4 小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒 ,英文名: 5-HIAA ELISA Kit
油酸鉀shēng huà shì jì容量:RT100克 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒HumanProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。