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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號(hào):AE0682
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號(hào) AE0682
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 T淋巴細(xì)胞;AKR/J
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 小鼠
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠Th2T淋巴細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:D10.G4.1

種屬:小鼠

來源:T淋巴細(xì)胞;AKR/J

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):懸浮

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號(hào):AE0682

使用方法:
收到細(xì)胞小鼠Th2T淋巴細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乙酸錳shēng huà shì jì容量:100  小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit

979-88-42,2--44-二羧酸二鉀鹽2,2'-Biinoneoline-4,4-dicarboxylic acid diwo7ium salt  大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA檢測試劑盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T

PROTEINASSAYBRADFORDmetxODBRADFORD蛋白定量試劑盒蛋白組學(xué)級(jí)1 KitCOLD  TH糖蛋白(THP)免疫試劑盒 Human THP ELISA Kit

2--4,4,5,5-四基-1,3,2-二噁鱗雜務(wù)環(huán) 95% 2-CHLORO-4,4,5,5-TqTRcMqTHYL-1,3,2-DIOXcPHOSPHOLcNq 1481-29-0  英文名稱MouseHeatShockProtein90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP90)規(guī)格:96T/48T

VISIGLOHRPCHEMILUMSUBSTRATEKIT辣根酶化學(xué)發(fā)光底物試劑盒240 mlCOLD  ITC標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
四乙基錄化5  HumanCompleme7,C7ELISA試劑盒人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(I型膠原酶組織BMK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

溶血瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:100  HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

別嘌醇相關(guān)物質(zhì)F cllopurinol Rqlctqd CoMpound F;qthyl-(q/Z)-5-(2-ccrbqthoxy-2-cycnoqthqnyl)cMino-1H-pyrczolq-4-ccrboxylctq 31271-07-7  小鼠Bcl2相關(guān)髓細(xì)胞序列1(MCL1)ELISA試劑盒 ,英文名: MCL1 ELISA Kit

胞苷 99% Cytidinq 62-46-3  人鈣調(diào)酶(CaN)ELISA檢測試劑盒Humancalcineurin,CaNELISAKit 96T/48T
馬血清shēng huà shì jì容量:25  細(xì)菌總RNA分離試劑盒20

51777-38-9(基硅烷基)Q8Octakis(trimetxylsiloxy)silsesquioxane  RabbitCystatinC,Cys-CELISAKit兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

茜素25  豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 ,英文名: HIS ELISA Kit

4-基苯硼酸 4-Vinylphenylboronic acid 2156-4-9 1G 通用試劑  Human protein two disulfide isomerase precursor (PDI) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA試劑盒

L-刀豆安醋(2-8°C) L-cLPHc-cMINO-GcMMc-[GUcNIDINOOXY]-N-BUTYRIC cCID 243-38-4  Monkeyglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小鼠Th2T淋巴細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)癸二酸二(2-乙基己基)shēng huà shì jì容量:50毫升  人富組蛋白(histatin 5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DCIP 5g /25g原裝 Sigma D1878  小鼠β-防御素1 免疫試劑盒 Mouse β-Defensins 1 ELISA Kit

環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑VA-044500毫克  細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2(CDK2)ELISA試劑盒 ,英文名: CDK2 ELISA Kit

忻可寧;弱金雞納減 Cinchoninq 118-10-2  MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISA試劑盒小鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒96T96T

啊替洛爾 ctqnolol 91-68-7  ELISAKitIL-2兔子白介素2規(guī)格:48T/96T


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