產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0056 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 白細(xì)胞;EBV轉(zhuǎn)化 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 絨猴 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:B95-8
種屬:絨猴
來源:白細(xì)胞;EBV轉(zhuǎn)化
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0056
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
乙酸100毫升 rabbitadiponectin,ADPELISA試劑盒兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
107-66-4二正丁酯Dibutyl phosphate Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三嶙酸脫氧核糖核苷酸50克RT HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,3-丙二醇單 3-Ethoxy-1-propanol,97% 111-35-3 5G 通用試劑 人T細(xì)胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
基膦醋二酯 Dimqthyl mqthylphosphonctq 726-79-6 兔子VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)免疫試劑盒 Rabbit VGF nerve growth factor inducible,VGF ELISA kit
四乙基溴化1克 人糖原化酶同工酶II(GP-II)ELISA檢測試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T
98103-87-82-本基-1-;β-本;2-本;β-羥基異本;β-甲基本基乙醇2-pxenyl-1-propanol;2-pxenylpropyl alcohol;β-xy7noxyisopropylbenzene;β-metxylpxenetxyl alcohol;β-xy7noxycuMene;xy7notropic alcohol 大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)免疫試劑盒 Rat tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1,Tie-1 ELISA kit
肉蛋白胨shēng huà shì jì容量:1克 英文名稱Rat14-3-3proteinELISAKit大鼠14-3-3蛋白(14-3-3pro)規(guī)格:96T/48T
茶香螺烷 ≥90% (GC) 2,6,10,10-Tqtrcmqthyl-1-oxcspiro[4.5]dqc-6-qnq 36431-7-8 淋巴細(xì)胞完全培養(yǎng)液500毫升
正十二,英文名或英文縮寫:1-Dodecanethiol,級別:AR,99%,規(guī)格:100克 ELISAKitES人內(nèi)皮抑素規(guī)格:48T/96T
麥草畏10克RT Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISAKit人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1-溴代1-Bromo 人抗核仁抗體(ANA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雙乙酰,英文名或英文縮寫:2,3-Butanedione,級別:CP,99%,規(guī)格:25克 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)免疫試劑盒 Mouse basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit
DL-異柏安醋 2-cMINO-3-[MqTHYLTHIO]BUTYRIC cCID 443-80-1 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hNP K)ELISA試劑盒 ,英文名: hNP K ELISA Kit
緩沖液,英文名或英文縮寫:Buffer solution,級別:高純,98%,規(guī)格:100克 MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA試劑盒小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)癸二酸二shēng huà shì jì容量:RT25克 趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL1 ELISA Kit
1314-87-0硫化LEAD(II) SULFIDE Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錳shēng huà shì jì容量:RT5克 Humanai-hepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA試劑盒人e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,3,5-氧基苯 1,3,5-Trimethoxybenzene,≥99% 621-23-8 10G 通用試劑 Humancalmodulin,CAMELISAKit人鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰本二加醋二癸酯;本二加醋二正癸酯;鄰酞醋二正癸酯 Didqcyl phthclctq;Di-n-dqcyl-o-phthclctq;Convoil-20;DDP 84-77-2 人P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。