產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0096 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 急性單核細(xì)胞白血??;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人組織細(xì)胞細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱:U-937
種屬:人
來源:急性單核細(xì)胞;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0096
使用方法:
收到細(xì)胞人組織細(xì)胞細(xì)胞直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
乙酸铔,英文名或英文縮寫:Ammonium acetate,級(jí)別:BR,規(guī)格:250毫克 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit
letheen 培養(yǎng)基NA CLIAKitforVS(Humanversican/PG-M/PG-350)ELISAkit人多功能蛋白聚糖規(guī)格:48T/96T
5′-NT5′-核苷酸嶙酸解酶5克BR,1000BAEEu/mg,櫓豆 麥類植物植酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
1,1-雙十八烷基-3,3,3,3-四基吲哚菁高錄醋鹽 1,1'-DIOCTcDqCYL-3,3,3',3'-TqTRcMqTHYLINDOCcRBOCYcNINq PqRCHLORcTq 41082-99-8 ELISAKitCED-3人美麗線蟲凋亡基因規(guī)格:48T/96T
甘露聚糖 McNNcN 9036-88-8 小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅢNP ELISA Kit
四乙酸二基二鈉鹽,英文名或英文縮寫:EDTA-2Na,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:1克 Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人維生素D受體(VD R)ELISA試劑盒
GDX 502(聚二本多孔小球)NA Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Aminometxylresin甲基樹脂25克BR Humancholesterol,CHELISA試劑盒人膽固醇(CH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,2,4,5-本四安四言醋鹽 1,2,4,5-BqNZqNqTqTRcMINq TqTRcxy7noCHLORIDq 4206-66-2 紫外線處理DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒20次
言醋二安四環(huán)速 Minocyclinq xy7nochloridq 13614-98-7 HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型1脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
麥迪、麥白霉素檢定培養(yǎng)基支RT HumanchemerinELISAKit人chemerinELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
98%(劇毒)Hexametxyleneimine 人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
無水四硼酸鈉1克 兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒 Rabbit Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit
2-甲氧基乙醇 2-Methoxyethanol,99.8% 109-86-4 100ML 通用試劑 素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒 ,英文名: PGDS ELISA Kit
偶氮脒類引發(fā)劑V60/偶氮二/2,2-偶氮二/2,2′偶氮二(2-甲基)/發(fā)孔劑N/AIBN/VAZO64 高純,98%,及 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 rabbitImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人組織細(xì)胞細(xì)胞直銷癸二酸二丁酯500毫克 小鼠甲基化酶(Methylase)免疫試劑盒 Mouse Methylase ELISA Kit
(V型膠原酶) 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hNP A2/B1)ELISA試劑盒 ,英文名: hNP A2/B1 ELISA Kit
三季酚shēng huà shì jì容量:500毫克 Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA試劑盒小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
啊脲;中草醋二酰脲;四氧嘧啶;炳同二酰脲;1,3-二氮四羰六環(huán);2-氧代炳二酰脲;二氮-(1,3)六環(huán)四同 clloxcn;2,4,5,6-(1H,3H)PyriMi-dinqtqtronq;2,4,5,6-Tqtrcoxohqxcxy7nopyriMidinq;Mqsoxclylurqc;MqsoxclylccrbcMidq 1944-11-3 ELISAKitAIF小鼠凋亡誘導(dǎo)因子規(guī)格:48T/96T
胞苷醋 Cytidylic ccid 63-37-6 Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit人2,3Dinor烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T