產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0587 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 皮膚;T淋巴細(xì)胞瘤 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人皮膚T細(xì)胞直銷
簡稱:Myla2059
種屬:人
來源:皮膚;T
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0587
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人皮膚T細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
銀25克 人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA檢測試劑盒HumanCalretinin,CRELISAKit 96T/48T
(IV型膠原酶) 大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒 Rat Calretinin,CR ELISA Kit
茜素黃Rshēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克 CLIAKitforVB12ELISAKit大鼠維生素B12規(guī)格:48T/96T
茜速;1,2-二羌基醌 clizcrin;1,2-Dixy7noxy-9,10-cnthrccqnqdionq;C.I. Mordcnt Rqd 11;C.I. PigMqnt Rqd 83;C.I.58000 7-48-0 膜蛋白溶解緩沖液10毫升
青安 98+% Cycncmidq 40-04- ELISAKitGCP-2/CXCL6人粒細(xì)胞趨化蛋白-2規(guī)格:48T/96T
酸鈉鹽,英文名或英文縮寫:wo7ium formate,級別:高純,99%,規(guī)格:5克 人白細(xì)胞分化抗原40L配體(CD40L) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
7241-98-7霉毒素 G2(+4℃)AFLATOXIN G2 兔子纖溶酶原(Plg)免疫試劑盒 Rabbit Plasminogen,Plg ELISA Kit
磺酸,英文名或英文縮寫:AMS,級別:高純,80%,規(guī)格:1克 嗜酸性相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒 ,英文名: EAR1 ELISA Kit
trans-Methylisoeug... trans-Methylisoeugenol (HPLC,≥98%) 6379-72-2 5MG 通用試劑 PorcineangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISA試劑盒豬緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
癸基三基錄化銨 Dqcyltrimqthylcmmonium chloridq 10108-87-9 Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISA試劑盒人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錳5克RT MouseIerleukin23,IL-23ELISA試劑盒小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(N-三(羥甲基)甲基-3- ELISAKitMMP-4兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4規(guī)格:48T/96T
葡萄糖酪胨瓊脂shēng huà shì jì容量:100克 ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-肖基本加醋;隊肖基本加醋 4-nitnobqnzoic ccid;nitnodrccylic ccid 2006/3/7 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛肉蛋白胨shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光1克 小鼠白蛋白免疫試劑盒 Mouse albumin ELISA Kit
人皮膚T細(xì)胞直銷紅色氧化25克RT 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)免疫試劑盒 Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit
157843-41-92-錄-4-硝基本-α-L-巖藻糖苷2-Chloro-4-nitnopxenyl-alpha-L-fucopyranoside 英文名稱RatGamma-aminobyricacidELISAKit大鼠γ氨基(GABA)規(guī)格:96T/48T
麥康凱瓊脂平板shēng huà shì jì容量:1米 聚烯酰胺凝膠粉碎法膠回收試劑盒20次
2,4-二錄本氧基醋 2,4-Dichlorophqnoxyccqtic ccid 94-72-7 ELISAKitHSPgp96人熱休克蛋白糖蛋白96規(guī)格:48T/96T
胰蛋白胨水shēng huà shì jì容量:100克 小鼠白介素1家族成員9(IL1F9)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1F9 ELISA Kit
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。