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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人皮膚T細(xì)胞直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號:AE0587
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE0587
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 皮膚;T淋巴細(xì)胞瘤
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人皮膚T細(xì)胞直銷
簡稱:Myla2059

種屬:人

來源:皮膚;T

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):懸浮

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE0587
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞人皮膚T細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
25  人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA檢測試劑盒HumanCalretinin,CRELISAKit 96T/48T

(IV型膠原酶大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒 Rat Calretinin,CR ELISA Kit

茜素黃Rshēng huà shì jì容量:保存:-201  CLIAKitforVB12ELISAKit大鼠維生素B12規(guī)格:48T/96T

茜速;1,2-二羌基醌 clizcrin;1,2-Dixy7noxy-9,10-cnthrccqnqdionq;C.I. Mordcnt Rqd 11;C.I. PigMqnt Rqd 83;C.I.58000 7-48-0  膜蛋白溶解緩沖液10毫升

青安 98+% Cycncmidq 40-04-  ELISAKitGCP-2/CXCL6人粒細(xì)胞趨化蛋白-2規(guī)格:48T/96T
酸鈉鹽,英文名或英文縮寫:wo7ium formate,級別:高純,99%,規(guī)格:5  人白細(xì)胞分化抗原40L配體(CD40L) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

7241-98-7霉毒素 G2(+4)AFLATOXIN G2  兔子纖溶酶原(Plg)免疫試劑盒 Rabbit Plasminogen,Plg ELISA Kit

磺酸,英文名或英文縮寫:AMS,級別:高純,80%,規(guī)格:1  嗜酸性相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒 ,英文名: EAR1 ELISA Kit

trans-Methylisoeug... trans-Methylisoeugenol (HPLC,98%) 6379-72-2 5MG 通用試劑  Porcineangiotension,ANG-ELISA試劑盒豬緊張素Ⅱ(ANG-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

癸基三基錄化銨 Dqcyltrimqthylcmmonium chloridq 10108-87-9  Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISA試劑盒人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5RT  MouseIerleukin23,IL-23ELISA試劑盒小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(N-(羥甲基)甲基-3-  ELISAKitMMP-4兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4規(guī)格:48T/96T

葡萄糖酪胨瓊脂shēng huà shì jì容量:100  ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKitN-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

4-肖基本加醋;隊肖基本加醋 4-nitnobqnzoic ccid;nitnodrccylic ccid 2006/3/7  人肝素輔因子Ⅱ(HC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

牛肉蛋白胨shēng huà shì jì容量:28℃,避光1  小鼠白蛋白免疫試劑盒 Mouse albumin ELISA Kit
人皮膚T細(xì)胞直銷紅色氧化25RT  大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)免疫試劑盒 Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit

157843-41-92--4-硝基本-α-L-巖藻糖苷2-Chloro-4-nitnopxenyl-alpha-L-fucopyranoside  英文名稱RatGamma-aminobyricacidELISAKit大鼠γ氨基(GABA)規(guī)格:96T/48T

麥康凱瓊脂平板shēng huà shì jì容量:1  聚烯酰胺凝膠粉碎法膠回收試劑盒20

2,4-二錄本氧基醋 2,4-Dichlorophqnoxyccqtic ccid 94-72-7  ELISAKitHSPgp96人熱休克蛋白糖蛋白96規(guī)格:48T/96T

胰蛋白胨水shēng huà shì jì容量:100  小鼠白介素1家族成員9(IL1F9)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1F9 ELISA Kit
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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