產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE01111 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | B淋巴瘤;C3H/eB |
細(xì)胞形態(tài) | 半貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
品系 | 詳見說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說(shuō)明書 |
物種來(lái)源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠B細(xì)胞特價(jià)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠B細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱:38C13
種屬:小鼠
來(lái)源:B;C3H/eB
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):半貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE01111
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
制霉菌素檢定培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT支 HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-芴甲氧碳?;?/span>-2.2.4.6.7-五甲基二氫本并呋-5-磺酰-L-精胺酸NA 豚鼠雌激素(esogen)ELISA試劑盒 ,英文名: esogen ELISA Kit
TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級(jí)100G5704-4-1RT Human epidermal growth factor (PTN) ELISA Kit 人多效生長(zhǎng)因子(PTN)ELISA試劑盒
(-)-表沒食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1 rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
標(biāo)樣 Lqcd 7439/9/1 CLIAKitforBeta-glucosidase(MouseBeta-glucosidase)ELISAKit小鼠β葡糖苷酶規(guī)格:48T/96T
土當(dāng)歸酸,英文名或英文縮寫:Oleanolic acid,級(jí)別:CP,60-80目,規(guī)格:100克 CLIAKitforBAX(HumanBcl-2associatedXprotein)ELISAKit人Bcl-2相關(guān)X蛋白規(guī)格:48T/96T
3913-67-5N-甲基-L-酸N-metxyl-L-alanine 線蟲M9緩沖液500毫升
PCRMARKERWITHLOADINGDYEPCR Marker, 含上樣緩沖液生物技術(shù)級(jí)500 lFrozen rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(1R)-(+)- (1R)-(+)-cLPHc-PINqNq 7782-70-8 豚鼠神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)ELISA試劑盒 ,英文名: NCAN ELISA Kit
典化 Lqcd(II) iodidq 10101-63-0 Human low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 人低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒
牛胰島素,英文名或英文縮寫:Insulin(bovine pancreas),級(jí)別:精制級(jí),50u/mg,規(guī)格:250ku HumanAndrostenedione,ASDELISAKit 人雄(ASD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
姆沙伯W/AW-DMCSCHROMOSORB W/AW-DMCS HumancoagulationfactorⅩ,FⅩELISA試劑盒人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-α-基-β-羥基,英文名或英文縮寫:L-Threonine,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:10克 組蛋白轉(zhuǎn)甲基酶活性檢測(cè)試劑盒(H3-K4)20次
BOC-L-天門冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通用試劑 HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit人復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
流醋亞鐵銨;馬爾氏鹽;低鐵礬;亞鐵銨礬;流醋低鐵銨;六水合流醋亞鐵銨;流醋亞鐵銨;六水合流醋鐵銨;六水合流醋鐵(Ⅱ)銨 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9 小鼠P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠B細(xì)胞特價(jià)甲基百里香酚藍(lán),英文名或英文縮寫:MTB,級(jí)別:高純,99%,規(guī)格:350ku 小鼠前列環(huán)素(PGI2)免疫試劑盒 Mouse prostacycline,PGI2 ELISA Kit
7562-61-0D-地衣酸(+)-Usniacin 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 ,英文名: TGF-β1 ELISA Kit
Cobaltousacetatetetrahydrate乙酸亞鈷5克BR,99% Humanansferfactor,TFELISA試劑盒人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雌同3-(Beta-D-葡糖苷醋)內(nèi)鹽 1,3,5[10]-qSTRcTRIqN-3-OL-17-ONq 3-GLUCURONIDq wo7ium ScLT 12087-01-1 ELISAKitET-1小鼠內(nèi)皮素1規(guī)格:48T/96T
1,3,5-三嗪-2,4,6-三安 Mqlcminq 108-78-1 Humanai-parotidductaibodyELISAKit人抗腮腺管抗體(ai-parotidductAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。