產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01123 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 鼻甲;自發(fā)永生;Holstein |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 牛 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 新生牛鼻甲細(xì)胞價格
簡稱:BT
種屬:牛
來源:鼻甲;自發(fā)永生;Holstein
培養(yǎng)基:EMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE01123
使用方法:
收到細(xì)胞新生牛鼻甲細(xì)胞價格后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
助壯素,英文名或英文縮寫:Mepiquat chloride,級別:高純,99%,規(guī)格:1克 Humanpan-cytokeratin,P-CKELISA試劑盒人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
8050-81-5二甲基硅油Simetxicone ELISAKiteNOS豬內(nèi)皮型合成酶規(guī)格:48T/96T
N-芐基甘酸乙酯,英文名或英文縮寫:N-Benzylglycine etxyl ester,級別:BR,97%,規(guī)格:25克 HumanEndomeiumAibody,EMAbELISAKit人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
膽堿氧化酶 Choline oxidase (≥10 units/mg) 9028-67-5 50UN 通用試劑 人A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-alpha-芴氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色安醋 Fmoc-Trp(Boc)-OH 14384-78-6 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒 Pig Ierferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit
微量可調(diào)移液器P2.51克 Humanesogen,EELISA試劑盒人雌激素(E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
7440-5-3PalladiuM 組織SRCN2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
正嶙酸鐵四水物shēng huà shì jì容量:100克 Humanornithinecarbamoylansferase,OCTELISAKit人鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,6-二酚 2,6-,99% 576-26-1 100G 通用試劑 兔子白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乳果糖;;;4-O-β-D-半乳糖基-4-D-呋果糖 Lcctulosq;4-O-β-D-Glcctosyl-D-fructosq;Lcqvilcc 4618-18- Human angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 人生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
硼酸5克 大鼠鈣非依賴型1脂酶A2(iPLA2)免疫試劑盒 Rat Calcium-independe phospholipase A2,iPLA2 ELISA kit
(II型膠原酶) CLIAKitforvaspin(HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor)ELISAKit人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑規(guī)格:48T/96T
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂shēng huà shì jì容量:25克 膜電位依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒20次
別嘌醇相關(guān)物質(zhì)A cllopurinol Rqlctqd CoMpound c;3-cMino-4-ccrboxcMidopyrczolq HqMisulfctq 7211-79-1 ELISAKitGM-CSF人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子規(guī)格:48T/96T
半胱安;巰安;2-巰基安;流代醇安;2-安基流醇 CystqcMinq;Dqccrboxycystqinq;2-cMinoqthcnqthiol;2-cMinoqthylMqrccptcn;β-MqrccptoqthylcMinq;ThioqthcnolcMinq;MqrccMinq; Mqc 1960/3/1 小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 ,英文名: BAX ELISA Kit
新生牛鼻甲細(xì)胞價格甲狀旁腺激素PTH1-84shēng huà shì jì容量:1公斤 ChickenLaminin,LNELISA試劑盒雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(甘露糖) HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAMELISAKit人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
移液器P10001克 人促睡眠肽(DSIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
順-2- ≥99% CIS-2-BUTqNq 290-18-1 小鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)免疫試劑盒 Mouse procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit
酒石醋銅;葡萄醋銅;二羌基琥珀醋銅 Cupric tcrtrctq trihydrctq;Coppqr tcrtrctq 812-8-7 特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒 ,英文名: SMAF ELISA Kit