產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0819 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 主動脈;內(nèi)皮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷
簡稱:MAEC
種屬:小鼠
來源:主動脈;內(nèi)皮細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0819
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
紫脲酸5克 小鼠Apelin小鼠13蛋白(AP13)ELISA試劑盒 ,英文名: AP13 ELISA Kit
(預(yù)雜交液) 人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA檢測試劑盒HumanCollagenaseIELISAKit 96T/48T
五水亞嶙酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium phosphite dibasic pentahydrate,級別:BR,95%,規(guī)格:100克 大鼠復(fù)制蛋白A 70kDaDNA結(jié)合亞基(RPA1)免疫試劑盒 Rat replication protein A 70 kDa DNA-binding subunit,RPA1 ELISA kit
1本隆 ;賽本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmino-1,2,3-thicdiczolq 21707-22- CLIAKitforUU-Ab(HumanUreaplasmaurealyticumaibody)ELISAKit人解脲脲原體抗體規(guī)格:48T/96T
1,4-氧氮雜環(huán)已烷,英文名或英文縮寫:Morpholine,級別:2N,200-300目,規(guī)格:25毫克 離子膜通道轉(zhuǎn)運功能檢測試劑盒20次
微量可調(diào)移液器P20shēng huà shì jì容量:5克 Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA試劑盒小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(電泳等電點標(biāo)準(zhǔn)PH2.5-6.5) ELISAKitMCP-3/CCL7小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3規(guī)格:48T/96T
L-脯酰胺25克 Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9-基 9-Mqthylcnthrccqnq 779-0- 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
FERROUSSULFATE,ANxy7noUS亞鐵,無水美國藥典級1KG7720-78-7RT 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit
硼酸shēng huà shì jì容量:RT10克 CLIAKitforVA(HumanVitaminA)ELISAKit人維生素A規(guī)格:48T/96T
Pronase 250mg/1g Roche分裝 膜相關(guān)結(jié)構(gòu)免疫化學(xué)固著溶液10毫升
蘋果酸鈉三水物5克2~8℃ ELISAKitCG人冷球蛋白規(guī)格:48T/96T
1本隆 ;賽本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmino-1,2,3-thicdiczolq 21707-22- 小鼠ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白C6(ABCC6)ELISA試劑盒 ,英文名: ABCC6 ELISA Kit
IODOACETAMIDE代乙酰胺蛋白組學(xué)級 人降鈣素原(PCT)ELISA檢測試劑盒HumanProcalcitonin,PCTELISAKit 96T/48T
小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷鉀shēng huà shì jì容量:RT25克 βAMYLOID蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
4043-87-22-派啶DL-Pipecolinic acid RabbieceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
定量濾紙100毫克保存:-20℃ 小鼠癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2,4,6-三(烯炳氧基)-1,3,5-三嗪 2,4,6-Tricllyloxy-1,3,5-triczi 101-37-1 Rat adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 大鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒
移液器吸頭25U2~8℃ HumancrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit 人Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝