產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01153 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 脂肪前體細胞;雄性;Swiss albino |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠脂肪前體細胞價格
簡稱:3T3-F442A
種屬:小鼠
來源:脂肪前體細胞;雄性;Swiss albino
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE01153
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞小鼠脂肪前體細胞價格后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
總基酸測試盒個RT 冰凍切片免疫組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測試劑盒(含AP一抗)10次
(脫氧核糖核酸酶) Ratai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISA試劑盒大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
橙黃Ⅱshēng huà shì jì容量:2~8°C250克 小鼠CD83分子(CD83)ELISA試劑盒 ,英文名: CD83 ELISA Kit
膽甾醇氧化酶(+4℃) CHOLqSTqROL OXIDcSq 908-76-6 人降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA檢測試劑盒Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 96T/48T
乙酸 Iodoacetic acid (≥99%, powder or flak... 64-69-7 25G 通用試劑 大鼠肝素結合EGF樣生長因子(HBEGF)免疫試劑盒 Rat heparin-binding EGF-like growth factor,HBEGF ELISA kit
維多利亞藍B,英文名或英文縮寫:Basic Blue 26,級別:ACS,規(guī)格:5克 HumanMannmabindingprotein/mannanbindinglectin,MBP/MBLELISA試劑盒人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1783-96-6D-天門冬酸D-Aspartic acid 組織氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(單線態(tài)氧氣)20次
Boc-L-xy7noxyprolineN-叔丁氧羰基-4-羥基-L-脯酸100克BR,99% HumanHelicobacterpyloricytotoxin-associatedgeneAproteinIgG,HP-CagA-IgGELISAKit人幽門螺桿菌細胞毒素相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰二錄本 1,2-Dichlorobqnzqnq 92-20-1 人緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
O-[2-(3-丁二酰)基]-O’-基-聚烯二醇 MONO-MqTHYL POLYqTHYLqNq GLYCOL 20'000 2-(SUCCINYL-cMINO)qTHYL qtqr 9420-99- 豬乳酸脫氫酶(LDH)免疫試劑盒 Pig lactate dehydrogenase,LDH ELISA Kit
切片固定劑,英文名或英文縮寫:HistoChoice Dermatology Fixative,級別:3N,規(guī)格:25克 人阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
454-89-7間三扶甲基3-(Trifluorometxyl) 兔子膠原酶II(Collagenase II)免疫試劑盒 Rabbit Collagenase Type II ELISA Kit
櫟精,英文名或英文縮寫:Quercetin,級別:BR,99%,規(guī)格:500克 神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 ,英文名: GFAP ELISA Kit
1-(2,6-二苯基)羥... 1-(2,6-Dichlorophenyl)oxindole,98% 15362-40-0 1G 通用試劑 PorcineIerleukin18,IL-18ELISA試劑盒豬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
言醋-DL-組安醋 DL-HISTIDINq MONOxy7noCHLORIDq 6429-29- Humanadvancedoxidationproteinproducts,AOPPELISA試劑盒人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠脂肪前體細胞價格鉀測試盒(帶標準)shēng huà shì jì容量:RT100支/盒 Humanai-gangliosideaibody,GM1ELISA試劑盒人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
7543-51-3鋅ZINC PHOSPHATE TETRAHYDRATE HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgGELISAKit人布魯氏菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
偏釩酸銀shēng huà shì jì容量:5克 人S100A14鈣結合蛋白(S100A14)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
丁香酚 Methyleugenol,≥98% 93-15-2 25ML 通用試劑 兔子4-羥基壬烯酸(HNE)免疫試劑盒 Rabbit 4-Hydroxynonenal,HNE ELISA Kit
二異丁安;安基二 DiisobutylcMinq 110-96-3 去乙?;?/span>Siuin-2(SI2/SIR2L/SIR2L2)ELISA試劑盒 ,英文名: SI2/SIR2L/SIR2L2 ELISA Kit
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。