產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0582 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 胰島素瘤;C57BL/6 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 小鼠胰島β細(xì)胞直銷
簡稱:MIN6
種屬:小鼠
來源:瘤;C57BL/6
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0582
使用方法:
收到細(xì)胞小鼠胰島β細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
佐旋葡萄酸,英文名或英文縮寫:L(+)-Tartaric acid,級別:CP,99%,規(guī)格:100毫升 ChickenAcetoaceticacid,ACACELISAKit雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Nalidixicacid 5g/10g/25g/50g Amresco 0677 人環(huán)孢霉素A(CsA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
BIOBLOCKINTBSBIO-BLOCK膜阻斷試劑(于1XTBS)生物技術(shù)級1LCOLD 小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)免疫試劑盒 Mouse Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISA Kit
三拂基迷絡(luò)合物 Boron trifluoridq qtqrctq 109-63-7 內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR3/Flt4 ELISA Kit
CBZ-L-TryptophanN-芐氧羰基-L-色酸100克特純,99% MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISA試劑盒小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蝸牛凝集素,英文名或英文縮寫:Snailagglutinin,級別:BR,Ⅰ型,>125CDU/mg,規(guī)格:100克 小鼠膽固醇(CH)免疫試劑盒 Mouse cholesterol,CH ELISA Kit
(L-半胱酸鹽酸鹽) 性因子裂解酶(ADAMTS-13/vWF-cp)ELISA試劑盒 ,英文名: ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit
IPTG異丙基-β-D-硫代半乳糖糖苷800UBR,98% Mousedeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁酰安 ButyrcMidq;ButcncMidq;ButyrylcMidq;Butyric cMidq 241-32-2 ELISAKitCⅠCP小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽規(guī)格:48T/96T
苯磺酸 (超純) Benzenesulfonic acid (, 98.0%) 1998-11-3 25G 通用試劑 ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISAKit雞樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
偏硼酸鈉shēng huà shì jì容量:500克 大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)免疫試劑盒 Rat tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA kit
60-23-1半胱胺;巰;2-巰基;硫代;2-基乙CysteaMine;Decarboxycysteine;2-AMinoethanethiol;2-AMinoetxylMercaptan;β-MercaptoetxylaMine;ThioethanolaMine;MercaMine; MEA 英文名稱Rat15-lipoxygenaseELISAKit大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2′-脫氧腺苷250克 淋巴細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液500毫升
季務(wù)四醇鱗醋酯 2,6,7-Trioxc-1-phosphcbicyclo2.2.2octcnq-4-mqthcnol, 1-oxidq 2301-78-0 ELISAKitEL人內(nèi)皮脂肪酶規(guī)格:48T/96T
二硫代蘇糖醇100克 小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A11 ELISA Kit
小鼠胰島β細(xì)胞直銷堿式碳酸鎳shēng huà shì jì容量:RT25克 Mouseplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D- 10g/25g/100g/500g原裝 Sigma M2069 ChickenAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒雞抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
單道定時(shí)鐘500毫克 Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2ELISAKit人11去氫烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二十二碳六烯醋 cis-4,7,10,13,16,19-Docoschqxcqnoic ccid 617-24-2 人蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溴化亞銅 Cuprous bromidq 7787-70-4 小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)免疫試劑盒 Mouse C-C Chemokine receptor 6,CCR-6 ELISA Kit