產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0568 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 腸粘膜;微血管;內(nèi)皮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 大鼠 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 鼠腸粘膜微內(nèi)皮細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱:RIMEC
種屬:大鼠
來源:腸粘膜;微;內(nèi)皮細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0568
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞鼠腸粘膜微內(nèi)皮細(xì)胞直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Pefloxacin mesylate 70458-95-6 中文名:甲磺酸培氟沙星 分子式:C18H24FN3O6S 度:98.0% 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Pazufloxacin mesilate 163680-77-1 中文名:甲磺酸帕珠沙星 分子式:C17H19FN2O7S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠緊張素 I (mouse ANG I) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) Phoenix
Pazopanib 444731-52-6 中文名:帕唑帕尼 分子式:C21H23N7O2S 度:98.0% 小鼠緊張素 II (mouse ANG II) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) Phoenix
Paroxetine 78246-49-8 中文名:鹽酸帕羅西汀 分子式:C19H21ClFNO3 度:99.0% mouse CD 40L ELISA Kit 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
Paris Saponin VII 68124-04-9 中文名:重樓皂苷VII 分子式:C51H82O21 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 大鼠 C 反應(yīng)蛋白 (rat CRP) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) ADI
小鼠上腺素(E)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Hydroxyprogesterone 68-96-2 中文名:羥孕酮 分子式:C21H30O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠上腺素 英文名稱: Mouse 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EPI Dabigatran etexilate 中文名: 分子式:C34H41N7O5
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽elisa試劑盒 小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒、小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Iloperidone 133454-47-4 中文名:伊潘立酮 分子式:C24H27FN2O4
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽-78(mouse ENA-78) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Diclofenac 15307-79-6 中文名:雙氯芬酸鈉 分子式:C14H10Cl2NNaO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ikshusterol 3-O-glucoside 112137-81-2 中文名: 分子式:C35H60O7
2-Benzylacrylic acid 5669-19-2 中文名: 分子式:C10H10O2 組織HCK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Racecadotril 81110-73-8 中文名:消旋卡多曲 分子式:C21H23NO4S HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人抗副病毒IgG抗體(ai-PIVIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 147086-79-1 中文名: 分子式:C8H8OS2 豚鼠白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-22 ELISA Kit
Dorzolomide 130693-82-2 中文名:鹽酸多佐胺 分子式:C10H17ClN2O4S3 Human ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit 人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒
Quetiapine fumarate 111974-72-2 中文名:富馬酸喹硫平 分子式:C46H54N6O8S2 RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit 兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
鼠腸粘膜微內(nèi)皮細(xì)胞直銷大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Triptoquinone A 142950-86-5 中文名: 分子式:C20H24O4 度:% 關(guān)鍵詞:
催乳素 英文名稱: Prolactin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PRL O-Benzyl-L-serine 4726-96-9 中文名:O-芐基-L-絲氨酸 分子式:C10H13NO3
催產(chǎn)素 英文名稱: Oxytocin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: OT Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside 1186628-87-4 中文名: 分子式:C41H58O14 度:97.5% 關(guān)鍵詞: ; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
促上腺皮質(zhì)激素 英文名稱: Adrenocor Ticoopic Hormore 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACTH Olanzapine 132539-06-1 中文名:奧氮平 分子式:C17H20N4S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
促紅細(xì)胞生成素受體 ( EPO Receipter) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 中文名: 分子式:C28H44O3 度:97.0%
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。